深低温长期保存角膜穿透性角膜移植术临床报告
眼科新进展 1999年第5期第19卷 病例报告
作者：刘红山 龚向明 张壮喜 李献华 季健萍 秦勇 冯宗榴
单位：510110广州市，广州市眼库中山医科大学眼科中心
关键词：角膜；深低温保存；移植
摘要 目的评价深低温长期保存角膜在穿透性角膜移植术中的应有价值。方法应用深低温长期保存21～1230d的供眼角膜行穿透性角膜移植术34例(35眼)。结果术后随访2～30(平均7.3±4.0)mo，角膜植片透明率达82.9％，部分患者视力改善，角膜植片内皮细胞密度达903～3083.7个 . mm－2(平均1641.8±599.3个 . mm－2)。结论深低温长期保存角膜具有较好的临床应用价值。
Penetrating keratoplasty with long－term cryopreserved corneas
LIU Hong Shan GONG Xiang Ming ZHANG Zhuang Xi LI Xian Hua JI Jian Ping QIN Yong FENG Zong Liu
From the Guangzhou Eye Bank, Guangzhou 510110,China
Abstract Objective To evaluate the effectiveness of penetrating keratoplasty with long－ term cryopreserved corneas.Methods 34 cases(35 eyes)were performed penetrating keratoplasty with human cadaver corneas long－ term cryopreserved 21 to 1 230 days,mean 20. 5± 11. 6 months.Results After following－ up of 2 to 30 (mean 7.3± 4. 0)months,corneal graft transparent rate was 82.9％ ,the visual acuity was improved significantly,graft endothelial density was 903 to 3 083.7(mean1 641.8± 599.3)个 . mm－ 2， Conclusion Long－ term cryopreserved cornea is very useful on penetrating keratoplasty.
Key words cornea cryopreservation transplantatoin
Capella等报导深低温长期保存角膜临床穿透性角膜移植术取得成功30a来，深低温保存角膜技术越来越受到眼科工作者的肯定，我国邱孝芝、王传富、刘金刚等在此领域也进行了探讨，获得了满意的结果[1～4]。我们应用程序冷冻系统对深低温保存技术进行了系列观察，取得了满意疗效，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 供眼角膜及其降温前处理供体年龄6～30a,平均25.9±11.6a。分别于死后0.5～3(1.29±1.12)h摘除眼球，0～4℃湿房保存1.5～20(8.77±3.40)h，然后切取带1～2mm巩膜环的角巩膜帽，置0～4℃角膜冷冻保护剂中按照Capella等人的四步法平衡，各步平衡液的组成成分见表1。
以上每步平衡10min，第Ⅲ步结束后，将角膜移入装有2mL第Ⅳ步冷冻保护剂的无菌壁薄而均匀的青霉素瓶中，10min后立即进行程序降温。
1.2 角膜的降温及保存平衡后的角膜迅速移入微机监控的程序冷冻系统，同时另设一个装有同样冷冻保护剂的对照瓶，将角膜标本温度探子插入保护剂中，以测定标本中的温度变化。降温时，以角膜保护剂的温度作标准，首先等待温度稳定于4℃，再以2℃ . min－1降温至－30℃，这期间当温度降至－8℃～－14℃，可见3℃～7℃的温度回升的释放热曲线，然后以5℃ . min－1降温至－80℃，其后立即将瓶子浸入液氮中长期保存。本组所用角膜分别保存了21～1230d，平均20.5±11.6mo。
1.3 受眼条件34例(35眼)接受治疗的患者，男18例，女16例；年龄分别为11—79(平均41.3±18.5)a。其中，感染性角膜溃疡合并穿孔21例，陈旧性角膜瘢痕12例，角膜营养不良1例(2眼)。中取出装有角膜的瓶子，放入55℃～60℃的温水中轻轻摆动，角膜周围仅存薄冰时，将角膜移入预冷的20％白蛋白中保存备用。术中取出角膜，轻轻吸除表面的血清白蛋白，于内皮面涂适量的透明质酸钠，应用真空角膜环钻由内皮面制作角膜植片，除2例为7mm×11mm的扇形角膜植片外其余为7.5～10mm的圆形植片。另外，对于细菌、真菌感染病例术中应用抗生素或抗真菌药物行眼内冲洗，其它操作同常规穿透性角膜移植术。
1.4 术后处理及观察常规单眼绷带包扎，每日换药1次，d2或d3以局部用药为主，药物选用皮质类固醇激素及抗生素或/和抗真菌或抗病毒类，1mo以后加用环胞霉素A局部应用；术手3～6mo拆除角膜缝线，2mo后应用角膜内皮细胞分析仪(EM－1000和EM－1020)进行植片光学区角膜内皮细胞分析。
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