表2 两种雌激素受体在两性大鼠赤道部晶状体上皮细胞中的表达(略)
3讨论
3.1 ER在大鼠晶状体的定位和分布特点 本研究采用免疫组织化学方法观察到ER在性成熟SD大鼠晶状体的定位和分布特点。ERα和ERβ存在于细胞核及少量胞质中,这与Hales等[10] 和Cammarata等[11]在基因水平的研究一致。ER免疫反应阳性物质主要位于赤道部晶状体上皮细胞(LECs) 和部分较新形成的晶状体纤维的细胞核及少量胞质中,而中央部和周边部晶状体上皮细胞、晶状体囊膜及老化晶状体纤维内未见阳性着色。晶状体是由表皮外胚叶发育而来的一种屈光介质,是由不同时期的晶状体上皮细胞构成的[12-14]。正常晶状体内一般只有赤道部弓行区的上皮细胞有丝分裂旺盛而中央区的上皮细胞相对静止。随着新的晶状体上皮细胞的不断产生,旧的上皮细胞被挤向赤道部成为分化细胞而分化、拉长,形成晶状体纤维,其增多的胞质向后沿囊下,向前于上皮下延伸,细胞核变扁平。最深层的纤维细胞最终失去细胞核而形成晶状体核。本研究发现大鼠晶状体ER表达部位与上述生理特性相吻合,表明ER参与了晶状体的生理调节。同时本研究还观察到着色强度上ERα表达细胞较ERβ更强,数量上ERα阳性细胞数较ERβ多,但相同部位两种蛋白表达量没有统计学差异,表明两种受体共同参与了晶状体的生理调节。
3.2大鼠晶状体ER表达的性别差异 本实验显示雌性与雄性大鼠晶状体均有阳性免疫反应,提示雌激素对两性晶状体兼具有生理作用。其各自作用机制及相互关系尚待进一步研究。
3.3大鼠晶状体ER表达的意义 经典的雌激素作用模式为:雌激素自由穿透细胞膜,与胞质中的受体结合使受体被激活,然后转移到细胞核中,与靶基因启动区内的ERE结合进而激发转录。Swada等[15]对雌激素基因水平作用的研究也表明:雌激素与核内特异性受体结合调整基因的转录,诱导功能不同的蛋白质合成,从而产生不同的生理效应。随着雌激素信号传导分子机理的深入研究,新的雌激素信号传导模式被提出:雌激素在细胞核中与受体蛋白结合,受体被激活;激活的ERα和ERβ形成同种或异种二聚体;一些共同调节因子与二聚体形成复合物;复合物与ERE结合启动转录。此外,ERα,ERβ也可不与雌激素或拮抗剂结合而被激活,上皮生长因子及胰岛素生长因子可通过MAPK蛋白激酶使受体磷酸化进而激活转录。由此说明,雌激素受体的信号传导是一个复杂的生理过程。 有研究间接证明雌激素直接通过ER发挥作用: 在对原发性乳癌患者的随访中发现,使用雌激素拮抗剂tamoxifen 4~5a及以上者,其白内障发生率较不用者高。而本研究从蛋白水平显示ERα,ERβ在两性大鼠晶状体上皮细胞中均有表达,且ERα和ERβ阳性着色主要在细胞核和少量胞质,ERα胞浆中表达更多,可能与实验中采用的ERα一抗为多克隆抗体而ERβ一抗为单克隆抗体有关。此结果表明,雌激素参与大鼠晶状体的生理调节,雌激素对晶状体的保护作用机制可能是通过ERα,ERβ共同发挥的,直接的受体介导可能是雌激素发挥晶状体保护作用的重要途径之一,ERα和ERβ在此介导作用中的异同及相互关系尚有待进一步研究。
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