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2结果
2.1直接检眼镜观察
VEGF组、VEGF+NS组实验眼注射后1d表现为玻璃体腔中度混浊，随后逐渐减轻，5～6d后玻璃体腔恢复透明。约10d表现为眼底后极部视网膜大血管呈结节样扩张，周围视网膜水肿,2wk时重度扩张（图1A）。VEGF+EBHM组实验眼，注射后1d表现为玻璃体腔轻度混浊，随后逐渐减轻，至4～6d恢复透明。约10d表现为眼底后极部视网膜大血管呈结节样扩张改变，周围视网膜水肿，但较VEGF组、VEGF+NS组轻（图1B）。
2.2眼底荧光血管造影
VEGF组实验眼灌注时间延长,在视盘及其附近、后极部大血管扩张区出现高荧光，荧光素从扩张区中央开始消退。VEGF+EBHM组实验眼后极部血管局限性高荧光较VEGF组弱、显示范围小（图2A,B）。
2.3组织学观察
正常大鼠视网膜层次清晰，3个核层明显，细胞密集，核浓染。正常对照组、自身对照眼视网膜无明显变化。各组实验眼3μm连续切片，每隔30μm随机选取1张，每眼观察16张。未见突破视网膜内界膜的血管内皮细胞，内界膜完整。正常大鼠视网膜内核层毛细血管由血管内皮细胞、周细胞、基底膜形成。内皮细胞呈扁长形，核较大，胞浆稀少。周细胞位于内皮细胞周围，呈细长形，细胞核呈卵圆形。含有线粒体、粗面内质网等超微结构。较多的胞浆分支包围血管壁。基底膜环绕在内皮细胞、周细胞的外围，为一电子密度均一的连续的膜性结构。VEGF组、VEGF+NS组实验眼视网膜血管内皮细胞肥大，血管管腔缩窄,与正常对照组比较差异有显著性（P<0。05）（图3A,B）而VEGF+EBHM组实验眼视网膜血管内皮细胞无肥大，血管管腔无缩窄（图3C）,与正常对照组比较差异无显著性（P>0.05）,而与VEGF组比较差异有显著性（P<0.05,表1)。
2.4视网膜电图振荡电位总波幅
VEGF组，VEGF+NS组实验眼视网膜电图振荡电位总波幅降低，与正常对照眼比较，差异有显著性（P<0.05）。VEGF+EBHM组实验眼视网膜电图振荡电位总波幅没有变化，与正常对照组比较，差异无显著性（P>0.05）。与VEGF组比较，差异有显著性（P<0.05,表1）。表1视网膜毛细血管管腔面积、内皮细胞面积和视网膜电图振荡电位总波幅的比较（略）
3讨论
VEGF通过与其受体结合增强微血管通透性，内皮细胞葡萄糖转运。能促进不同来源血管内皮细胞分裂增殖，促使血管内皮细胞迁移[1]。VEGF缓释装置诱导的视网膜病变[2],VEGF诱导的猕猴视网膜病变类似于糖尿病性视网膜病变[3]。采用ADPase染色的方法，证明周边部眼底存在视网膜前新生血管[4]。VEGF诱导猴视网膜血管内皮细胞肥大亦有报道[5]。我们的研究[6,7]显示：高浓度VEGF短时间（2wk）作用可以诱导大鼠视网膜内核层毛细血管内皮细胞肥大，管腔面积减少，视网膜电图振荡电位总波幅降低。
VEGF诱导的视网膜血管病变的药物防治包括血管内皮细胞增殖抑制剂,单克隆抗体介导的血管生成抑制剂,蛋白激酶C（proteinn kinase C,PKC）的特异性抑制剂和内源性抑制剂等等。灯盏细辛是菊科飞蓬属植物短葶飞蓬的干燥全草制剂，其有效成分主要有羟基黄芩素、4羟基黄芩素7βD葡萄糖甙，4羟基黄芩素7βD葡萄糖醛酸甲酯甙，焦呋康酸，多种黄酮等50余种化合物。研究发现其具有抗凝、扩张血管、改善微循环的作用。可用于治疗眼压控制后的青光眼视野缺损[8]、视网膜血管阻塞性疾病、高血压性眼底视网膜出血后遗症[9]。我们采用VEGF诱导的大鼠早期视网膜血管病变为动物模型,使用ip灯盏细辛浸膏溶液，对这种早期病变显示有抑制作用，对视网膜电图的振荡电位的总波幅具有改善作用。实验中我们未作眼后部血流的B超检查，缺乏血液动力学的依据。但是我们可以从微观方面解释。视网膜内核层的毛细血管较浅层毛细血管大，因而承担的血流量较大，可以代表视网膜微循环状况。毛细血管内皮细胞肥大，大动脉扩张，导致微血管灌注障碍。而灯盏细辛治疗后，病变得到部分抑制，反映视网膜微循环的视网膜电图的振荡电位总波幅得以提高。我们可以认为EBHM对rrVEGF164的大鼠早期视网膜血管病变的微循环具有改善作用。建立家兔慢性高眼压模型后，ip EBHM注射液，能减低家兔慢性高眼压状态下的视网膜毛细血管的通透性[10]。实验中我们发现EBHM治疗组视网膜水肿减轻,一定程度可以间接反映EBHM的血眼屏障保护的作用,但是直接的证据有待进一步研究。
【参考文献】
1蒋瑶祁,彭辉灿. VEGF家族及其受体与视网膜新生血管形成.国际眼科杂志2006;6(5):11131116
2 Alikacem N, Yoshizawa T, Nelson KD, et al. Quantitative MR imaging study of intravitreal sustained release of VEGF in rabbits. Invest
Ophthalmol Vis Sci2000;41(6):15611569
3 Tolentino MJ, Miller JW, Gragoudas ES, et al. Intravitreous injections of vascular endothelial growth factor produce retinal ischemia and microangiopathy in an adult primate. Ophthalmology1996;103(11):18201828
4 Tolentino MJ, Mcleod DS, Tanomoto M, et al. Pathologic features of vascular endothelial growth factorinduced retinopathy in the Nohuman primate. Am J Ophthalmol2002;133(3):373385
5 Hofman P, van Blijswijk BC, Gaillard PJ, et al. Endothelial cell hypertrophy induced by vascular endothelial growth factor in the retina: new insights into the pathogenesis of capillary nonperfusion. Arch Ophthalmol2001;119 （6）:861866
6王启常,唐罗生.外源性VEGF诱导的大鼠视网膜血管病变.国际眼科杂志2006;6(2):369372
7唐罗生,王启常.灯盏细辛抑制外源性VEGF诱导的大鼠视网膜血管病变TGFβ1的表达.国际眼科杂志2007;7(2):365367
8贾莉君，蒋幼芹，吴振中.青光康片对眼压已控制的晚期青光眼临床疗效观察.中国实用眼科杂志1994;12(5):269273
9梁风书.益脉康片的药理毒理研究.云南中医中药杂志1996;17(1):3132
10李艳艳，蒋幼芹，吴振中.青光康对家兔慢性高眼压视网膜毛细血管损伤的保护作用研究.眼科实践 1998;1:35 上一页 [1] [2] |
