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2结果
2.1眼底照相
光凝手术结束时，可见静脉内明显黑色血栓形成，静脉粗细不均，远端静脉迂曲，扩张（图1A）。光凝术后第2d，可见主要视网膜静脉迂曲、粗大，栓塞引起静脉出血（图1 B）。
2.2 2wk后视网膜铺片显示光凝眼与对照眼视网膜血管形态
对照眼大鼠视网膜见深浅两层血管网，从视神经周围发出走向视网膜周边，浅层血管呈放射状分布，深层血管呈网状分布，血管逐级分支，和人类视网膜血管走行相似。大血管在走行过程中分出小的侧支，走行与大血管接近垂直，靠近周边部处大血管分支为弓形血管，在此基础上又发出侧支(图2 AD)。光凝眼视网膜网膜血管形态和分布发生明显改变，失去了正常的分布形态。主要静脉闭塞，血管走行僵直，迂曲扩张，分支减少。视网膜血管杂乱、纵横交错，可见视网膜表面的新生血管向玻璃体腔突出生长，出现异常吻合的新生血管网、新生血管团，可见渗漏荧光素（图3 AD）。
3讨论
目前用于研究视网膜新生血管形成机制及抗血管新生治疗的动物模型有以下几种：高氧诱导动物致血管增生性视网膜病变；光凝、电凝等方法造成视网膜静脉阻塞，致视网膜血管新生；玻璃体腔注射血管生长因子；转基因小鼠眼内新生血管模型等等。选择易重复、稳定性好、而且经济的模型为研究提供可靠的实验对象。
光动力诱导视网膜新生血管模型[2,3]：光敏剂虎红（四氯四碘荧光素二钠）受532nm激光激发后，激发血液中的氧产生氧自由基，损伤血管的内皮细胞，导致胶原纤维暴露，诱发血小板聚集，引起视网膜静脉内血栓形成。血管壁损伤的同时释放一系列促凝血因子，加速血栓的形成。静脉血栓形成导致血液回流障碍及视网膜缺血缺氧，最终产生新生血管。这种模型在成年大鼠实施，简单易行，经济实用。但该方法存在光凝的程度受较多因素影响，很难在每一个动物体内都保持一致，个体间的差异较大等问题。其他方法：(1)凝血酶静脉滴注法[4,5]：通过静脉注射凝血酶，造成血液高凝状态，形成视网膜静脉血栓，但该方法形成的血栓具有不确定性，可能造成其他部位的栓塞。(2)玻璃体腔注入内皮素1法[5,6]：内皮素1具有强烈缩血管作用，该方法可造成暂时的完全性视网膜血管阻塞，但这种阻塞是由于血管严重痉挛造成，不适合做治疗性研究。高氧诱导视网膜新生血管模型(氧致增殖性视网膜病变动物模型)：出生后的动物让其生活于高氧环境之中，未发育完全的视网膜血管反应性收缩，导致周边的毛细血管发育障碍，产生无灌注区。动物返回正常氧环境后，未血管化的视网膜相对缺氧，引起大量的血管生成因子表达，促使新生血管产生[79]。该方法成模率较高、构建周期短、模型间差异小、其他因素影响小。此外还有糖尿病视网膜病变模型；玻璃体腔直接注射血管内皮细胞生长因子（VEGF）[10]、透明质酸钠、IL1[11]和纤维母细胞等，诱导视网膜血管扩张、渗漏、微血管瘤和新生血管的生成,但该类方法尚处于研究阶段。
视网膜新生血管的观察方法比较:(1)眼底荧光造影：眼底血管荧光造影能清晰显示视网膜动静脉的动态血循环，使人们既直观又客观地观察视网膜血管的情况。但合适的造影剂剂量、正确的给药途径、连续的图像捕捉可影响观察的效果。同时该方法只能做粗略的比较，在量化视网膜血管渗漏程度方面受诸多因素干扰，结果的可比性较差。（2）视网膜铺片法： FITCdextran心内灌注视网膜铺片[12]异硫一氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate，FITC）黄色粉末，有2种异构体，易溶于水和酒精等溶剂，在溶解状态下呈黄绿色荧光。采用FITC－dextran心内灌注视网膜铺片是一种简单易行的检测方法。FITC分子质量相对较高（2×106），不会通过毛细血管壁渗漏，能较好的显示视网膜血管形态和分布的改变以及新生血管的形成，有利于进行测量。同时，该方法制作快、易重复。但标本只能使用一次，不利于进一步研究如免疫组织化学测定等。临床所采用的荧光素钠分子量较低，易造成弥散渗漏，不适用于铺片观察。
本研究在动物模型构建上选择了光动力法诱导视网膜静脉阻塞的模型，该方法是较为成熟的视网膜新生血管造模方法，它简单易行、成模率较高。对于新生血管形态的观察我们采用了心内灌注FITCdextran，视网膜铺片的方法。该方法制作快、易重复，可全面的反映整个视网膜血管新生的情况。但是该方法不能在同一动物身上实现连续动态的观察，故在进一步研究中，可结合眼底荧光造影的方法对不同时期的视网膜血管形态进行连续的对比观察。
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