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3讨论
角膜新生血管是与角膜化学性烧伤、角膜炎症及角膜移植排斥反应密切相关的常见病理现象，尽管CNV的生长有利于病原体的清除和组织修复，但其严重破坏了角膜的透明性，最终导致眼部结构组织的破坏和视功能的损害，成为临床上致盲的主要原因之一。多种血管形成调节因子在角膜新生血管形成过程中发挥重要作用，其中VEGF被认为是最直接的眼球内新生血管形成因子。目前研究表明[2]，VEGF的过度表达与CNV的发生发展密切相关，其生物学效应是通过内皮细胞表面的两个酪氨酸受体Flt1和KDR来发挥作用的，Philipp等[3]实验发现VEGF及其受体在炎症性角膜血管化时高表达[4]。VEGF的超常表达使血管内皮细胞分裂、增殖、迁移，毛细血管基底膜降解，形成新的血管腔[5]。
一氧化氮（nitric oxide，NO）是一种化学性质活泼且不稳定的气体，半衰期极短，在体内很快转化为稳定的终末产物硝酸盐和亚硝酸盐。NO与内皮细胞增殖，迁移，蛋白酶的释放以及增加血管通透性有关，在促进血管生成过程中起着重要作用。研究表明，VEGF与其受体结合后通过NO在细胞内进行信号传导而发挥作用。NO是VEGF诱导血管内皮细胞移行和血管发生允许因子，它可以影响VEGF促进血管生成和血管渗透性改变的作用[4]。在体内，一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）是催化NO产生的唯一关键酶，在眼内含量丰富，角膜上皮和内皮均含有NOS，NOS分为神经型NOS（neuronal NOS，nNOS）、内皮型NOS（endothelial NOS，eNOS）和诱导型NOS（inducible NOS，iNOS）。iNOS为钙非依赖性，正常状态无表达，在角膜碱烧伤后iNOSmRNA表达增高，并在整个疾病过程中保持较高水平，从而持续大量产生NO，在VEGF信号活动中NO起着不可或缺的作用[6,7]。NO通过缺氧诱导因子1（HIF1）的积累和其DNA粘结活性的增强而诱导VEGF基因的转录，从而上调VEGF的表达[8]。也有研究发现，NO通过激活可溶性的鸟苷酸环化酶，调节细胞内cGMP水平而发挥上调VEGF表达的作用[9]。
姜黄素是从中药姜黄中提取的一种植物多酚，具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、降血脂等多种生物学活性，近年来大量研究证实其对肿瘤血管生成具有抑制作用，体外细胞实验显示姜黄素可以降低VEGFmRNA及VEGF蛋白在鼻咽癌细胞中的表达。Pan等[10]发现姜黄素能明显降低脂多糖激活的巨噬细胞iNOS的产生，抑制NO的大量产生。
我们观察到姜黄素干预组角膜新生血管生长显著减少，其机制在于一方面姜黄素通过直接抑制VEGFmRNA及VEGF蛋白的表达来达到抗新生血管的作用；另一方面，姜黄素也可通过竞争性抑制iNOS，减少角膜组织中NO的产生，从而通过上述机制抑制VEGF的表达，有效抑制血管内皮细胞的增殖和迁移，减少新生血管的生长。但要得到证实还需要进一步用电泳迁移率检测对iNOS进行活性检测，并进行相关分析来发现VEGF与iNOS之间的联系。同时姜黄素还可通过调节多种细胞信号途径影响细胞蛋白，包括核转录因子（NFκB）、丝裂原活化的蛋白激酶、环氧合酶（COX）等，这些作用是否也参与其对角膜新生血管的抑制尚待进一步研究证实。
本实验研究证实，姜黄素可以明显抑制大鼠碱烧伤后角膜新生血管，为探讨角膜新生血管的发病机制和临床上防治角膜新生血管提供了新的思路。有关其制剂的最佳配制和最佳用药方式及浓度还需进一步探讨。
【参考文献】
1程蕾，张明昌.非洛贝特对大鼠角膜新生血管的影响.眼视光学杂志 2007;9(2):8386
2 Key BA, Nguyen HV, Berleau LT, et al. Identification of vascular endothelial growth factor determinants for binding LDR and Flt1 receptors. J Biol Chem1996;271(10): 56385646
3 Philipp W, Speicher L, Humpel C. Expression of vascular endothelial growth factor and its receptors in inflamed and vascularized human corneas. Invest Ophthalmol Vis Sci2000;41(9):25142522
4刘文慧,李一壮,吴永青.血管内皮生长因子与眼内新生血管.国际眼科杂志2007;7(6):16811684
5许荣,张明昌.反应停对大鼠碱烧伤诱导角膜新生血管的影响.国际眼科杂志2008;8(6):11461149
6 Babaei S, Stemart DJ. Overespression of endothelial NO synthase induces angiogenesis in a coculture model. Cardiovasc Res2002;55:190200
7李静,柳林,唐维强,等,诱导型一氧化氮合成酸在大鼠角膜新生血管模型的表达及意义.国际眼科杂志2004;4(2):253256
8 Kimura H, Weisz A, Kurashima Y, et al. Hypoxia response element of the human vascular endothelial growth factor gene mediates transcriptional regulation by nitric oxide: control of hypoxiainducible factor1 activity by nitric oxide. Blood2000;95(1):189197
9 Jenkins DC, Charles IG, Thomsen LL, et al. Role of nitric oxide in tumor growth. Proc Natl Acad Sci USA1995;92(10):43924396
10 Pan MH, LinShiau SY, Lin JK. Comparative studies on the suppression of nitric oxide synthase by curcumin and its hydrogenated metabolites through downregulation of IkappaB kinase and NFkappaB activation in macrophages. Biochem Pharmacol2000;60(11):16651676 上一页 [1] [2] |
