【关键词】 白内障;亚硒酸钠;超氧化物歧化酶;过氧化氢酶;丙二醛;谷胱苷肽过氧化酶;可溶性蛋白;不溶性蛋白
Abstract:[Objective] To study the effect and mechanism of action of FS-1272 gutta on cataract of rats induced by sodium selenite.[Method] By using themodel of cataract of rats induced by sodium selenite to observe the cataract opaque degree,the activities of SOD,CAT and GSH-px,the level of MDA,WSP and WIP.[Results] FS-1272 gutta can cause cataract opaque degree in rats decreased,the activities of SOD,CAT,GSH-px increased,and the level of MDA and insolubility protein decreased,level of solubility protein increased.[Conclusion]The FS-1272 gutta has the effect of delaying cataract to happen and develop by lessening the extent of the oxidative damage of lens.
Key words:cataract;sodium selenite;SOD;MDA;CAT;GSH-px;WSP;WIP
老年性白内障(senile cataract,SC)是一种发病率、致盲率均居于当今国内外眼病之首的老年性疾病[1]。本次实验采用亚硒酸钠性白内障模型来模拟老年性白内障,观察FS-1272滴眼液对大鼠硒性白内障的影响。
1 材料与方法
1.1 动物
选用10日龄SD乳鼠,由浙江中医药大学实验动物中心提供。
1.2 药物
FS-1272滴眼液:上海新药开发中心,批号:051108;白内停滴眼液:武汉五景药业有限公司,批号:060408;莎普爱思:浙江平湖莎普爱思制药有限公司,批号:060105;亚硒酸钠:天津市天达净化材料精细化工厂,批号:060410。
1.3 试剂及仪器mDA、SOD、GSH-px、CAT、蛋白质试剂盒:南京建成生物工程研究所,批号:20060907、20060906、20060907、20060906、20060907。YZ-5CSⅡ型裂隙灯,苏州六六视觉科技股份有限公司;HR-231CRY冷藏冷冻箱;UNIVERSAL320/320R台式低温高速离心机,德国Hettich公司;BT815A半自动生化仪,上海三科仪器有限公司。
1.4 实验方法
(1)分组:将乳鼠随机分为模型组、FS-1272滴眼液高、中、低剂量组、白内停组、莎普爱思组和空白对照组。(2)模型制备 参照文献[2]方法:各组动物(除空白对照组)颈部皮下注射0.0526%的亚硒酸钠溶液,剂量为2.63mg/kg体重,隔日1次,连续5d。(3)给药方法:模型组、空白对照组动物滴生理盐水;白内停组、莎普爱思组动物分别滴白内停、莎普爱思(5次/d);FS-1272滴眼液高、中、低(8次/d、5次/d、2次/d)三剂量组滴FS-1272滴眼液。造模两天后开始给药,连续14d。
1.5 观察指标及检测方法
1.5.1 晶状体混浊度
造模开始后,于第5、7、9、11、14、16天观察大鼠晶体。晶体混浊度参照张家萍等的标准做了一定修改,如下:Ⅰ无混浊,晶体透明清亮;Ⅱ核混浊,即晶状体核发生混浊,但皮质仍清亮;Ⅲ核混浊加重,同时可见晶体皮质有点,片状混浊;Ⅳ全混浊,晶状体核及皮质均完全混浊,形成成熟白内障。
1.5.2 晶状体生化指标
停药1d后,将大鼠拉颈处死,分离晶体并放入-80℃冰箱保存。测定时,加入生理盐水,冰浴下研磨成5%的晶体匀浆。生化指标测定方法按试剂盒说明操作。
1.6 统计学方法
晶体混浊度观察结果用Ridit分析进行检验;生化测定结果用SPSS统计软件进行方差分析,以x±s表示,P<0.05、P<0.01为差异显著性标志。
2 实验结果
各组大鼠晶状体混浊度的比较,见表1;SOD、GSH-px、CAT和MDA含量的比较见表2;晶状体可溶性蛋白、不溶性蛋白含量的比较,见表3。表1 FS-1272滴眼液对大鼠晶状体混浊度的影响(略)表2 对大鼠晶体SOD、CAT、GSH-px、MDA含量的影响(略)表3 对大鼠晶状体可溶性蛋白、不溶性蛋白含量的影响(略)
3 分析与讨论
老年性白内障(SC)的诱发因素多种多样,[3]其中氧化损伤机制已得到眼科学术界的公认。SOD、CAT和GSH-px这三种抗氧化酶,在保护晶状体的氧化损伤方面发挥着极其重要的作用。[4]MDA是脂质过氧化终末产物,它的多少直接反映晶状体的氧化损伤程度。[5]当晶状体氧化损伤到一定程度时,晶状体蛋白向不溶性蛋白过渡,白内障发生。本实验结果显示,FS-1272滴眼液能明显降低大鼠亚硒酸钠性白内障模型晶状体混浊度,增强SOD、CAT、GSH—px活性,同时降低MDA、不可溶性蛋白的含量,升高可溶蛋白的含量。这可认为FS-1272滴眼液能提高机体的抗氧化能力,降低氧化对晶状体的损伤,从而达到预防和治疗白内障的作用。
【参考文献】
[1]张士元.我国白内障的流行病学调查资料分析[J].中华眼科杂志,1999,35(5):336.
[2]张家萍.晶状体生化的研究:亚硒酸钠诱发大鼠白内障的研究[J].生物化学杂志,1985,1(5):15-19.
[3]何梅兰.重组水蛭素对大鼠半乳糖性白内障的防治作用[J].浙江中医学院学报,2004,28(1):73-75.
[4]GiraoH,Mota C,Pereira P.Cholesterolmay act as an antioxidant in lensmembranes[J].Cur Eye Res,1999,18(6):448-454.
[5]周大兴,吴森林.珍珠水提取液的抗炎、抗氧化作用[J].浙江中医学院学报,2001,25(4):41-42. |