杨静 谭浅 丁芝祥 胡梅
湘雅医院 桂林医学院附属医院 信阳中心医院 410008
目的：研究II型重组腺相关病毒(rAAV2)载体介导的增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）对兔晶状体上皮细胞的体内转染情况，以及对角膜和虹膜组织的毒性作用，为rAAV携带目的基因防治后囊混浊提供实验依据。
方法：将36只家兔随机分为A、B、C和D四组，其中A组为对照组，四组均行右眼白内障常规超声乳化吸出术，术毕分别向B、C、D三组的晶状体囊袋内注入基因组颗粒滴度分别为109v.g./ml、1010v.g./ml、1011v.g./ml rAAV-EGFP0.1ml，向A组晶体囊袋内注入0.1mlBSS。术后行裂隙灯及角膜内皮镜检查；分别于术后第1、2、4周处死每组3只家兔，取出囊袋作铺片，行DAPI染色，并在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达情况并计算转染效率；对角膜虹膜和后囊膜行HE染色。
结果：术后第1周就有EGFP表达，晶状体残留前囊膜及赤道部荧光染色较深，后囊中心部位荧光染色较淡。随着时间延长浓度增高表转染效率增高，术后4周时转染效率达94.49%。各组在不同时间转染率的差异有统计学意义（P<0.05）。HE染色显示，各组后囊膜、角膜及虹膜均无明显炎症反应与细胞坏死表现。角膜内皮镜结果显示角膜内皮细胞密度、细胞面积及变异系数各组对比差异无统计学意义(P>0.05）。
结论：rAAV2载体能安全有效的在体内转染兔晶状体上皮细胞，并有浓度和时间依赖性；rAAV2对角膜虹膜及后囊膜等眼内组织无明显毒性作用，是基因治疗PCO的理想载体。
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