杨玉霞   张平   刘杏   李永平   周立军   孟永

中山大学中山眼科中心   510060

目的：探讨卡铂大剂量冲击诱导视网膜母细胞瘤SO-Rb50成为耐药细胞SO-Rb50/CBP和其耐药机理。

方法：大剂量冲击用药诱导RB细胞系SO-Rb50成为耐卡铂细胞SO-Rb50/CBP；观察细胞形态、绘制生长曲线、测定群体倍增时间；MTT法测定SO-Rb50和SO-Rb50/CBP对顺铂等五种化疗药物的IC50值，计算耐药指数；免疫细胞化学染色方法和流式细胞仪检测SO-Rb50和SO-Rb50/CBP的p-gp、MRP、LRP、GST-∏蛋白的表达；半定量RT-PCR检测多药耐药基因（MDR1）、多药耐药相关蛋白（MRP）基因、肺癌耐药蛋白（LRP）基因、谷胱甘肽 S 转移酶（GST-π）基因的表达。

结果：经10个月诱导，成功建立SO-Rb50的耐药细胞SO-Rb50/CBP，耐药指数15.7倍。亲本细胞与耐药细胞群体倍增时间分别是44.32小时和50.9小时。SO-Rb50/CBP对CBP、DDP、VCR、MMC、VP-16和5-Fu的耐药指数分别是15.7，6.89，5.68，4.58，2.28和1.88。SO-Rb50/CBP的LRP、GST-π蛋白、p-gp和MRP表达的阳性率分别是97.26、96.19、87.67和89.21，亲本细胞四种蛋白的阳性率分别为20.92、20.12、40.33和30.48。SO-Rb50和SO-Rb50/CBP均表达MDR1、MRP、LRP及GST-π基因。SO-Rb50/CBP的MDR1、MRP、LRP及GST-∏的mRNA表达水平明显增高。

结论：卡铂大剂量冲击可诱导视网膜母细胞瘤SO-Rb50成耐药细胞SO-Rb50/CBP。SO-Rb50/CBP除对卡铂耐药，还对VP-16，MMC，DDP，VCR 产生耐药，具有多药耐药现象，耐药现象的产生与耐药蛋白表达的提高有关。