作者：彭芳玲，龙荣，阳利龙，胡勤 作者单位：湖南省儿童医院，湖南长沙 410007
【摘要】 目的：建立近视康合剂质量的控制方法。方法：采用薄层色谱法对原儿茶醛和芍药苷进行定性鉴别，利用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶（4.6 mm×200 mm，5 μm）为固定相，以甲醇1%冰醋酸（15∶85）为流动相，流速为1.0 mL/min,检测波长为281 nm，测定原儿茶醛的含量。结果：薄层色谱鉴别方法专属性强，原儿茶醛在6.20～62.00 μg/mL浓度范围与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为96.74%，RSD＝3.5%（n＝6）。结论：该方法简便、准确，具有实用性，可作为近视康合剂的质量控制标准。
【关键词】 近视康合剂；原儿茶醛；芍药苷；薄层色谱法；高效液相色谱法
近视康合剂是我院应用多年的纯中药复方制剂，由丹参、当归、白芍等十二味中药组成，具有养血活血、疏肝健脾、升阳明目的作用。用于假性近视及弱视的恢复治疗，疗效显著，不良反应少。方中丹参为君药，它的活性成分有脂溶性菲醌类衍生物和水溶性酚酸类，水溶性酚酸类成分包括原儿茶醛、丹参素、原儿茶酸、丹酚酸A、B、C等。丹参制剂的质量控制标准不尽统一［17］。近视康合剂起主要药理作用的是其水溶性成分，其中原儿茶醛是代表酚酸类的主要成分，抗血小板聚集、清除氧自由基等作用较菲醌类衍生物更强。为了临床用药准确有效，更有效的控制其质量，我们采用TLC对近视康合剂中原儿茶醛和芍药苷进行定性鉴别，用高效液相色谱法测定原儿茶醛的含量，为该制剂提供较完善的质量控制方法。
1 仪器与试药
1.1 仪器
AgilentL 100高效液相色谱议（G1311A四元泵，G131A自动进样器，G131A柱温箱，G1311A检测器，Chemstations工作站），BS210S型电子天平（德国赛多利斯股份公司）。
1.2 试药
原儿茶醛对照品（中国药品生物制品检定所），甲醇为色谱纯（天津科密欧化学试剂有限公司），水为重蒸馏水，近视康合剂（自制，其中药材经鉴定均符合2005年版《中国药典》各品种项下标准），其它试剂均为分析纯。
2 处方与制备
2.1 处方
丹参、当归、党参、白术、枸杞子、锁阳、柴胡、菊花、石决明、甘草、白药、茯苓。
2.2 制备工艺
将丹参、当归、白芍等十二味中药，加水浸泡20 min后（石决明包煎），加水煎煮2次，第一次2h，第二次1.5h，合并煎液，过滤，滤液浓缩至约800mL，离心，取上清液，加羟苯乙酯0.4 g（用少量药用酒精溶解）及甜菊糖苷（食用）0.5 g（用少量纯化水溶解），加纯化水制成约1 000 mL，搅匀，分装，流通蒸气灭菌30 min即得。
3 质量控制
3.1 薄层鉴别
3.1.1 丹参的TLC［8］ 取本品30 mL，加盐酸1 mL，加热回流30 min，放冷，用醋酸乙酯振摇提取2次，每次20 mL，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2 mL使其溶解，作为供试品溶液。另取原儿茶醛对照品，加甲醇制成每毫升含1 mg的溶液，作为对照品溶液。参照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）试验，吸取上述两种溶液各3 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿丙酮甲酸（8∶1∶1）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干。喷以2%铁氰化钾溶液与1%三氯化铁溶液（1∶1）的混合液显色。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.1.2 白芍的TLC［9］ 取本品30 mL，加以水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次25 mL，合并正丁醇液，在水浴上蒸至近干，加中性氧化铝1 g，拌匀，蒸干，加于已处理好的中性氧化铝柱（直径1.5 cm；1 g）上，用乙醇乙酸乙酯（1∶1）混合溶液20 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。取芍药苷对照品适量，加甲醇制成1 mg/mL的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）试验，吸取供试品溶液10μL，对照品溶液5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿乙酸乙酯甲醇甲酸（40∶5∶10∶0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.2 近视康合剂中原儿茶醛的含量测定
3.2.1 色谱条件 色谱柱：HypersiL ODS2（4.6 mm×200 mm，5 μm）柱，柱温35 ℃；流动相：甲醇1%冰醋酸（15∶85）；流速：1.0 mL/min，检测波长281 nm；进样量10 μL；定量方法为外标法，理论塔板数按原儿茶醛计算应不低于2 000。
3.3.2 对照品溶液的制备 精取原儿茶醛对照品适量加50％甲醇适量配成310.00 μg/mL作贮备液。
3.3.3 供试品溶液的制备 精取本品1 mL置具塞磨口离心管中，精密加入50%甲醇4 mL，混匀，离心，静置片刻，用0.45 μm的微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。
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