董志章 李娟 刘炳干 葛坚
中山大学中山眼科中心 510060
目的:研究淀粉样蛋白1-42对视网膜色素上皮细胞的作用与损伤机制。
方法:原代培养的视网膜色素上皮细胞给予不同浓度淀粉样蛋白1-42刺激,通过MTT方法检测细胞的存活率,TUNEL方法与Annevix-v-FITC检测凋亡,H2-DCFHDA检测活性氧量,用FITC标记的右旋糖酐检测经上皮细胞通透性,用real time PCR检测闭锁蛋白小体ZO-1的mRNA,western blot,免疫组化检测ZO-1的表达。
结果:细胞的存活率随着淀粉样蛋白1-42浓度增加而降低,凋亡增多,活性氧产生升高,细胞通透性增加;ZO-1mRNA表达略有下降,且zo-1表达不规则,从胞膜表面向胞浆集中。
结论:淀粉样蛋白1-42可以造成视网膜色素上皮细胞的功能改变,提示淀粉样蛋白1-42可能参与了某些视网膜变性性疾病发生
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