严明

武汉大学中南医院   430071

目的：通过建立自制的量子点荧光免疫组织化学技术，对人晶状体缝隙连接蛋白（Connexin，Cx）50表达水平进行检测。

方法：将正常人和先天性白内障患者的晶状体标本制成石蜡切片，以兔抗人晶状体缝隙连接蛋白50抗体(H-65)为一抗，以含生物素化的羊抗兔IgG为二抗和量子点偶联二抗（将聚乙二醇（PEG）修饰的CdSe/ZnS核-壳型量子点与羊抗兔的二抗偶联制备成荧光标记的二抗），分别采用链霉卵白素-过氧化物酶连结（S-P）法（以含生物素化的羊抗兔IgG为二抗）和量子点偶联的二抗（聚乙二醇（PEG）修饰的CdSe/ZnS核-壳型量子点与羊抗兔的二抗偶联制备成荧光标记的二抗）S-P法，与兔抗人晶状体缝隙连接蛋白50的一抗结合，分别在光学显微镜和荧光显微镜下观察正常人和先天性白内障患者的缝隙连接蛋白50表达水平的变化，对正常人和先天性白内障患者的晶状体细胞Cx50蛋白表达水平进行检测。

结果：通过链霉卵白素-过氧化物酶连结（S-P）法和量子点偶联二抗S-P法，对患者和正常对照的晶状体标本进行Cx50蛋白的免疫组织化学分析，发现家系中白内障患者晶状体缝隙连接蛋白表达水平均高于正常对照组；和链霉卵白素-过氧化物酶连结（S-P）法比较，量子点偶联二抗式S-P法具有结果更清晰，敏感度高的优点。

结论：量子点荧光标记二抗在检测组织蛋白表达水平中具有一定优势，值得推广应用。