|
2.2 RTPCR方法检测EGFR mRNA表达
老年白内障与正常成人晶状体上皮组织以及培养的正常成人晶状体上皮细胞EGFR mRNA均呈阳性表达（图1）。
2.3 免疫组织化学方法检测晶状体上皮细胞EGFR蛋白表达
老年白内障与正常成人晶状体上皮组织（图2）以及培养的正常成人晶状体上皮细胞（图3）EGFR均呈阳性表达：细胞呈棕黄色着色，细胞核较大，位于细胞中央，呈圆形或椭圆形。
3 讨 论
体外培养人晶体上皮细胞成功与否，主要取决于2个因素，一个是标本的量，另一个是供体的年龄。体外培养细胞数较少时，细胞增殖缓慢或不增殖，这与群体依赖性（population dependent，PD）即细胞增殖需依赖一定的细胞密度有关。笔者用两种方法培养的年龄相关白内障术中撕取的前囊膜（约5～6 mm直径），晶状体上皮细胞均具有增殖能力，但传代培养基本不能增殖，无法达到进一步实验所需的细胞量。原因主要是年龄较大，晶体上皮细胞增殖能力明显减弱。但是，对胎儿及成人晶体上皮细胞的培养，两种方法均生长良好。
后发性白内障是现代白内障手术后的一个常见并发症，也是影响术后视力再次下降的最主要原因。目前公认的机制是术后残留的晶状体上皮细胞增殖和迁移是形成后发性白内障的主要原因〔1〕。EGF是一种促进增殖的细胞因子，其生物学作用的发挥有赖于特异的EGFR存在，并与之结合。人晶体上皮细胞表达EGFR〔2～5〕，可能与晶状体上皮细胞增殖有关。EGFR是一种糖蛋白，是具有酪氨酸激酶活性的膜表面传感器，广泛分布于分裂增生活跃的组织〔6，7〕，其介导的培养传导效应具有多向性，包括增殖迁移、细胞分化和内环境稳定等。本研究发现人眼晶状体上皮细胞EGFR mRNA及蛋白呈阳性表达，这一结果可为在基因水平探索EGF在晶状体上皮细胞增殖中的作用及临床治疗后发性白内障障奠定理论基础。
【参考文献】
1 Tassignon MJ，Tassignon MJ,De Groot V,et al.Bag in the lens implantation of intraocular lenses〔J〕.J Cataract Refract Surg，2002；28(7):11828.
2 Chen KC，Zhou Y，Zhang W,et al.Control of PDGFinduced reactive oxygen species (ROS) generation and signal transduction in human lens epithelial cells〔J〕.Mol Vis，2007；13:37487.
3 Perdue N，Yan Q.Caveolin1 is upregulated in transdifferentiated lens epithelial cells butminimal in normal human and murine lenses〔J〕.Exp Eye Res，2006；83(5):115461.
4 Maidment JM，Duncan G,Tamiya S,et al.Regional differences in tyrosine kinase receptor signaling components determine differential growth patterns in the human lens〔J〕.Invest Ophthalmol Vis Sci，2004；45(5):142735.
5 Wang L，Wormstone IM，Reddan JR,et al.Growth factor receptor signalling in human lens cells:role of the calcium store〔J〕.Exp Eye Res，2005；80(6):88595.
6 Grigsby PW，Malyapa RS，Higashikubo R,et al.Comparison of molecular markers of hypoxia and imaging with (60)CuATSM in cancer of the uterine cervix〔J〕.Mol Imaging Biol，2007；9(5)：27883.
7 Mitsui F，Dobashi Y，Imoto I,et al.Nonincidental coamplification of Myc and ERBB2，and Myc and EGFR，in gastric adenocarcinomas〔J〕.Mod Pathol，2007；20(6)：62231.
基金项目：吉林省科技厅项目（200505185） 上一页 [1] [2] |
