中华眼底病杂志 1999年第2期第15卷 论著
作者：张军军 严密 张敏
单位：610041 成都，华西医科大学附属第一医院眼科(张军军、严密)，基础医学院同位素室(张敏)
关键词： 视网膜/病理学；光刺激；前列腺素／分析；地塞米松/药理学；疾病模型，动物
【摘要】 目的 研究视网膜光化学损伤中前列腺素(prostaglandin,PG)含量变化以及地塞米松(dexamethasone,DXM)对这种变化的影响。 方法 36只SD大鼠分为对照组和DXM组，后者于光照前3天开始，每日腹膜腔注射DXM(1 mg/kg)，连续5天。两组大鼠经（1900±106．9） lx,波长为510～560 nm的光连续照射24小时，于光照前及光照结束后的6小时和1，3，7，14天分别摘除眼球，用放射免疫分析法进行视网膜前列腺素E2(prostaglandin e2,PGE2)与6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)含量检测。 结果 对照组光照后6小时，1，3天PGE2的含量为(37．50±2．75，48．06±4．04，81．90±4．89) pg/mg，6-keto-PGF1α的含量为(4．68±0．69，7．50±0．57，10．40±0．71) pg/mg,明显高于DXM组相应时间点的PGE2(20．60±4．28，37．36±3．34，54．85±4．57) pg/mg及6-keto-PGF1α(2．50±0．59，4．68±0.81，6．87±1.10) pg/mg(P＜0．01)。 结论 DXM可抑制光化学损伤后视网膜中PG含量的升高，这对视网膜的光化学损伤可能起到改善作用。
中国图书资料分类法分类号 R774．1 R965．1
Prostaglandins in rat retina during photochemical damage
ZHANG Junjun,YAN Mi,ZHANG min.Department of Ophthalmology,First Affiliated Hospital,West China University of Medical Sciences,Chengdu 610041，China
【Abstract】 Purpose To evaluate the prostaglandins(PG) levels and to identify the effect of dexamethasone(DXM) on PG in response to photochemical insult in rat retina. Methods The experiments were performed on 36 SD rats which were separated into two groups,control and treated groups,and the latter received daily intraperitoneal injections of DXM (1 mg/kg) for 5 consecutive days,starting 3 days before light exposure.The animals were continually exposed to green fluorescent light(510-560 nm)with an illuminance level of （1 900±106.9） lx for 24 hrs.The retinal concentration of PGE2 and 6-keto-PGF1α were tested at 6hrs，1，3，7 and 14 days after light exposure． Results The PGE2 and 6-keto-PGF1α levels of the control groups (37.50±2.75,48.06±4.04,81.90±4.89） pg/mg and （4.68±0.69,7.50±0.57,10.40±0.71） pg/mg had significantly higher values than those of the treated rats(20.60±4.28,37.36±3.34,54.85±4.57） pg/mg and （2.50±0.59,4．68±0.81,6.87±1.10） pg/mg(P＜0.01) after 6 hrs,1 and3 days light exposure respectively. Conclusion By inhibition of PG synthesis,the DXM may play an ameliorative effect on retinal photochemical injury of rats.
【Key words】 Retina/pathology Photic stimulation Prostaglandins/analysis
dexamethasone/pharmacology Disease models,animal
前列腺素(PG)由花生四烯酸(arachidonic acid,AA)氧化而成，可引起小血管扩张及血管壁的通透性增加，导致组织水肿。同时，在AA的一系列氧化反应中所产生的自由基和丙二醛［1，2］，可进一步加重组织的损害。本研究通过观察大鼠视网膜光化学损伤中PG含量的改变以及地塞米松(DXM)对这种改变的影响，探讨视网膜光化学损伤可能的机制及防御途径。
1 材料与方法
1.1 实验动物 雌性健康的封闭群SD大鼠36只，体重在150～180g之间。暗室饲养10天后，进入光照箱接受波长为510～560nm，平均照度为(1900±106.9)lx的光照射24小时，光照后送回暗房饲养。按光照前、光照结束后6小时及1，3，7，14天6个时间点，将大鼠随机分为对照组与DXM处理组，共12组。动物模型制作同文献［3］。
1.2 6-keto-PGF1α的测定 大鼠眼球摘下后，即刻剥离出视网膜，称重后以无水乙醇0.1 ml固定，加生理盐水至1 ml，匀浆后于－45 ℃下保存，测定前3 500 r/min离心20分钟后取上清。样品提取液200 μl与6-keto-PGF1α抗血清反应后，加入 125 I-6-keto-PGF1α于4 ℃下过夜。加羊抗兔IgG于37 ℃下放置15分钟后，以3 500 r/min离心20分钟，用FJ-2003γ计数仪测定其沉淀的放射性。在标准曲线上查出样品的相应含量，并根据视网膜的湿重算出6-keto-PGF1α的含量。6-keto-PGF1α放射免疫分析试剂盒购自北京东亚免疫技术研究所。
1.3 PGE2的测定 样品的前期处理同6-keto-PGF1α测定。匀浆液以重蒸乙酸乙脂抽提2次，回收上清液以氮气吹干，加入1 ml无水乙醇，吹干后－45 ℃下保存，测定前加1 ml磷酸缓冲液复溶。样品提取液100 μl与PGE2抗体及 3 H-PGE2在4 ℃下反应24小时后，加入牛血清白蛋白及活性碳组成的分离剂，离心后取上清液，加入闪烁液及无水乙醇，以FJ-2105液体闪烁计数仪进行放射性计数。在标准曲线上查出样品的相应含量，并根据视网膜的湿重算出PGE2的含量。PGE2放射免疫分析试剂盒由中国医学科学院基础医学研究所提供。
1.4 数据统计 以SPSS/PC统计软件进行组间差异的显著性检验(t检验、校正t检验)。
2 结果
对照组光照后视网膜的6-keto-PGF1α含量和PGE2含量均逐渐升高，并在第3天时达到高峰，随后又逐渐回落，但直至第14天时仍未回复至光照前水平。DXM组的6-keto-PGF1α含量及PGE2含量也呈逐渐增加的趋势，但上升的速度较为缓慢，其峰值在第7天处。对照组6-keto-PGF1α及PGE2含量的峰值高于DXM组，两组之间差异显著(t值为6.03和4.37，P＜0.01)。在光照后的前3天，DXM组的6-keto-PGF1α及PGE2含量均明显较对照组低(t值分别为5．38，6．33，6．03和7．43，4．57，9．03，P＜0.01)；但在光照前及光照后7，14天时间点两组间无显著差异(t值分别为0．76，1．41和0．77，1．56，P＞0.05)(表1，2)。
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