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3讨论
Benezra等[8]首次报道在体外，正常新鲜的房水对应用促细胞分裂剂处理的淋巴细胞的增生有抑制作用。Kaiser等[9]发现房水可以抑制抗原刺激的T细胞的活化、增殖和分泌细胞因子。在房水的诸多生物活性中，发挥作用的主要成分是TGFβ2。房水中的TGFβ2在正常情况下，绝大部分以无活性的形式存在，激活后的TGFβ2才能发挥其相应的作用[10]。关于人眼组织中TGFβ2的来源，一般认为是眼组织的虹膜和睫状体上皮细胞、视网膜的色素上皮细胞自身合成的而不是由血循环中TGFβ2渗透所致。
TGFβ2在正常眼中的含量还不确定，但人们已经注意到一些疾病时其含量会有变化。本实验发现在角膜碱、酸、热烧伤后前房水中TGFβ2含量发生变化。大鼠角膜碱烧伤后4h TGFβ2的水平呈现一过性升高，然后下降，3d时TGFβ2含量再次升高，7d时达高峰，持续至第14d时仍高于正常，49d时降至正常水平。在以往的研究中我们已了解角膜碱烧伤是一个以过度的免疫应答为特点的病理性损伤过程，在这一过程中，许多细胞因子均发生了不同的变化。Sotozono等[11,12]利用RTPCR方法研究发现小鼠角膜碱烧伤后早期IL1和IL6 mRNA合成大幅度增强，分别在3d和7d达到峰值（53.2pg/cornea和23.6pg/cornea）。Planck等[13]利用RTPCR方法比较了角膜碱烧伤与角膜切割伤后1h到14d期间细胞因子的变化，发现两种角膜损伤的细胞因子表达有所不同，IL1α,TNFα和TGFβ1在两种损伤的角膜上均可检测到，但只有碱烧伤的角膜IL6和IL1β在伤后1~7d持续存在且mRNA水平显著增加。这说明角膜碱烧伤与角膜切割伤所产生的细胞因子不完全一样，两者虽均系外伤，但其发病机制应有不同。
Miyamo等[14]在角膜碱烧伤后3~14d用ELISA检测了IL1α、IL1β、IL6在视网膜的表达，结果显示IL1β、IL6在烧伤后3d显著增加，以IL6增加明显，第7d降至正常，而IL1α水平始终低于检测敏感度。IL1和IL6均是单核巨噬细胞产生的细胞因子。IL1具有较强的介导炎症的作用，能刺激PMN的趋化能力，促进PMN和血小板粘附到血管内皮细胞，从而浸润到角膜，这些细胞能够产生胶原酶、前列腺素、超氧化物，使角膜溶解。Drost等[15]发现IL1存在于烧伤患者的血清中，并呈升高趋势，但与感染无明显关系。IL1还能诱导创伤处成纤维细胞产生IL8和基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases, MMPs）[16]。IL6是急性期反应的重要介质，能诱导肝细胞产生急性期蛋白，诱导活化B淋巴细胞产生抗体，诱发T淋巴细胞增殖，IL6的大量释放对患者是个危险信号。角膜碱烧伤后IL1和IL6表达增高说明碱烧伤后眼的免疫微环境紊乱，表现为过度的炎症反应。在正常眼的内环境中，TGFβ2被认为是一种免疫调节剂，能调节免疫细胞和某些细胞因子的活性。它能够抑制IL1诱导的单核细胞和成纤维细胞产生IL6[1720]，抑制IL2诱导的T细胞增殖[21]，介导抗原特异性激活的T细胞生成，通过非抗原特异性机制抑制DTHT细胞介导的炎症反应，另外，它还能调节TNFα对细胞毒性T细胞的影响，抑制房水中淋巴细胞的活化和增殖[22,23]。因此，我们认为眼碱烧伤时TGFβ2水平升高是对IL1，IL6等细胞因子变化的反馈应答。机体内多种细胞因子和受体可以互相影响，互相制约，从而构成了一个复杂的、完整的细胞因子网络，共同调节细胞和组织的正常生理和病理过程。碱烧伤时IL1，IL6，TNF等表达增加，反馈性刺激虹膜和睫状体上皮细胞合成和分泌TGFβ2或激活TGFβ2前体，从而抑制IL1，IL6等分泌，抑制TNF表达，减轻炎症反应。TGFβ2水平在3d时增高，7d时达到高峰，与IL1和IL6的变化相吻合。
角膜热烧伤时TGFβ2的变化过程与碱烧伤类似，伤后4h TGFβ2的水平有一过性升高，1d时降至最低，3d时开始增长，直到7d时我们检测仍高于正常，之后缓慢下降，高水平状态持续时间较碱烧伤短（图3,4）。14d后TGFβ2水平处于低平状态，甚至低于正常，我们推测与TGFβ2的负反馈抑制有关。烧伤后4h TGFβ2的短暂升高我们认为是在应激状态下，虹膜、睫状体等受某些炎性介质作用反应性地增加TGFβ2的分泌或激活TGFβ前体复合物，使之具有生物活性，随着炎症反应的加重和烧伤对虹膜睫状体的破坏，TGFβ2合成减少，之后在组织蛋白酶D和纤维蛋白溶解酶的作用下，大量潜伏状态的TGFβ2被激活[24]，随病程进展，TGFβ2在负反馈机制作用下，表达减弱，低于正常。热烧伤后TGFβ2高水平表达时间较碱烧伤短与热烧伤后的炎症反应轻于碱烧伤有关。
角膜酸烧伤后TGFβ2的含量变化不同于前两者。酸烧伤后4h TGFβ2的水平应激性地呈现一过性升高，然后下降，7d时房水中TGFβ2才升至正常，然后一直保持低平状态，第49d时我们检测房水中TGFβ2水平仍低于正常。在角膜酸烧伤3d时没有出现TGFβ2的高峰我们认为与TGFβ2未被大量激活有关。从我们前一部分的研究中[25,26]发现无论是在粘附分子变化方面还是在角膜蛋白甚至基因合成方面，角膜酸烧伤均轻于碱烧伤和热烧伤，溃疡发生率低，炎性介质和各种蛋白酶分泌少，因此潜伏的TGFβ2未被大量活化。但对于在伤后7d甚至49d时TGFβ2始终处于低平状态，而且低于正常的原因，我们还不能提出合理的解释。TGFβ2在角膜酸烧伤中的作用机制还需要深入探讨和进一步研究。
角膜烧伤后房水中TGFβ2水平发生变化，致伤原因不同，其变化方式不同。角膜碱烧伤和热烧伤后于7d时出现TGFβ2高峰，说明此时角膜处于免疫功能抑制状态，这对于维持角膜前房的免疫赦免状态非常重要，证明此时机体发挥了自我保护功能，避免产生过度的病理反应。角膜酸烧伤后TGFβ2水平始终低平，其原因尚有待于进一步研究。
【参考文献】
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3 Tripathi RC, Chan WF, Li J, et al. Trabecular cells express the TGFbeta 2 gene and secrete the cytokine. Exp Eye Res1994;58(5):523528
4 Cousins SW, Trattle WB, Streilein JW. Immune privilege and suppression of immunogeni inflammation in the anterior chamber of the eye. Curr Eye Res1991;10(4):287297
5赵敏，陈家祺，杨培增.鼠角膜碱烧伤的免疫学研究.中华眼科杂志 2000;36:4042
6 Miyamoto F, Sotozono C, Ikeda T, et al. Retinal cytokine response in mouse alkaliburned eye. Ophthalmic Res1998;30(3):168171
7 Kao WW, Zhu G, Benza R, et al. Appearance of immune cells and expression of MHCII DQ molecule by fibroblast in alkaliburned corneas. Cornea1996;15(4):397408
8 Benezra D,Sachs U. Growth factors in aqueous humor of normal and inflamed eyes of rabbits. Invest Ophthalmol Vis Sci1974;13(11): 868870
9 Kaiser CJ, Ksander BR, Streilein JW. Inhibition of lymphocyte proliferation by aqueous humor. Reg Immunol1989;2(1):4249
10 Zhai JY, He XG. Advance of research on the relationship between aqueous humor cytokines and intraocular hypertension. Int J Ophthalmol(Guoji Yanke Zazhi)2007;7(6):16651667 上一页 [1] [2] |
