作者：熊蕾 王建明 熊全臣 惠 娜 范雅稚 张璐琰
作者单位：（710004）中国陕西省西安市，西安交通大学医学院第二附属医院眼科
【摘要】 目的：观察房水中碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）含量的变化，探讨低分子肝素（low molecular weight heparin, LMWH）抑制晶状体摘除术后前房炎症的机制。
方法：家兔84只随机分为对照组和实验组，每组42只，行单眼透明晶状体囊外摘除术。实验组手术结束时用浓度为50kU/L的 LMWH进行前房灌注。分别于术后1, 3, 6, 15, 30, 45, 60d每组各取6只家兔，裂隙灯显微镜下对角膜水肿、房水混浊及前房纤维蛋白渗出的程度进行观察和分级，然后处死动物，抽取房水用Elisa法测定bFGF的含量。另选6只健康家兔测定前房bFGF含量作为基线值。
结果：术后1～6d，实验组角膜水肿、房水混浊及前房纤维蛋白渗出的程度明显轻于对照组（P<0.01），15d后两组比较无差异。术后实验组和对照组房水bFGF含量同时升高，实验组1d达峰值，而对照组6d达峰值；达峰值后两组bFGF含量均缓慢下降。术后1～30d对照组bFGF含量明显高于实验组（P<0.05），45d后两组比较无显著性差异。
结论：应用浓度为50kU/L的LMWH前房灌注能显著降低兔眼晶状体囊外摘除术后前房炎症反应，其机制可能与房水中bFGF含量下调有关。
【关键词】 低分子肝素 炎症反应 房水 碱性成纤维细胞生长因子 晶状体囊外摘除
0引言
低分子肝素（low molecular weight heparin, LMWH）是由肝素经降解得到的低分子量的片段或经分级法得到的4000～6500Da低分子量组分。LMWH是一种传统的抗凝药物，已临床应用多年，安全、副作用少、疗效肯定。其抗血栓作用优于肝素，而抗凝血作用却低于肝素，具有生物利用度高，体内半衰期长，出血倾向小，口服易吸收等特点。由于其有效性和安全性均优于普通肝素，目前已成为肝素类药物研究的热点。近年来发现LMWH还具有抗炎，抗增殖，抗肿瘤等作用[1,2]。已经有学者把它应用于眼科临床，结果发现LMWH具有减轻眼部纤维渗出、减轻增殖、减轻角膜水肿、减轻后囊膜混浊等作用[3,4]。但是这些仅限于临床观察，缺乏相关机制等更深入的研究。碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）是重要的炎症相关因子，参与了眼内炎症反应和增殖反应的过程[5,6]。已有研究表明，LMWH可以抑制bFGF诱导培养的犬动脉平滑肌细胞增殖，显示出LMWH抑制细胞增殖的效应可能与抑制bFGF的作用有关[7]。尚未见到有关bFGF在LMWH抑制白内障摘除术后眼内炎症反应中作用的研究报道。因此我们观察了白内障摘除手术联合LMWH前房灌注对术后前房炎症反应的影响，并测定了术后不同时间房水中bFGF含量，探讨LMWH对晶状体摘除术后前房炎症反应的影响机制。
1材料和方法
1.1材料 健康新西兰白兔90只90眼，雌雄不限，质量约2 kg，由西安交通大学医学院动物实验中心提供。术前裂隙灯检查双眼无明显异常。速眠新Ⅱ注射液为农牧大学军事兽医研究所生产。LMWH注射液（商品名为速碧林）为法国葛兰素史克制药公司产品。测定房水bFGF含量的ELISA试剂盒为美国ADL公司产品。
1.2方法 90只家兔随机选取6只为空白对照组局麻下抽取单眼房水保存。其余84只家兔随机平均分为对照组和实验组（42眼/组），并行单眼透明晶状体囊外摘除术。两组动物手术方式相同，术中灌注液为眼用平衡盐。实验组缝合巩膜切口前，用50kU/L LMWH共10mL前房灌洗约1～2min，对照组不使用LMWH。所有手术均由同一术者操作。以角膜水肿、房水混浊和前房纤维蛋白渗出作为前房炎症观察指标。分别于术后1, 3, 6, 15, 30, 45, 60d每组各取6只家兔，裂隙灯显微镜下对角膜水肿、房水混浊及前房纤维蛋白渗出的程度进行观察和等级评定。按Nagahara等[8]的标准把角膜水肿程度分4级：0级为仅手术切口区角膜轻度水肿；1级为角膜轻度水肿，能看清虹膜纹理；2级为中度水肿，虹膜纹理模糊可见；3级为角膜完全混浊，不能看见虹膜。按武志峰等[4]的标准把房水混浊程度分3级：0级为强束光下可见5个以下浮游物，Tyndall征阳性；1级为强束光下可见6～10个浮游物，Tyndall征阳性；2级为强束光下可见10个以上可数浮游物，Tyndall征明显阳性；3级为房水明显混浊，浮游物多而不可数，Tyndall征强阳性。按Moon等[9]的标准把纤维蛋白渗出分5级：0级为无纤维蛋白伸出；1级为前房纤维蛋白渗出呈薄纱状，或短纤维丝附着于虹膜和瞳孔，但未形成横跨的桥状粘连；2级为纤维蛋白渗出形成中厚膜，小于覆盖虹膜瞳孔表面的1/2；3级为纤维蛋白渗出形成全表1 术后3d不同等级角膜水肿房水混浊纤维渗出眼数表2 不同时间点对照组和实验组房水bFGF含量 厚膜，或纤维凝块小于前房1/2；4级为纤维蛋白凝块大于前房1/2。分别于术后1, 3, 6, 15, 30, 45, 60d每组各取6只家兔，眼部裂隙灯显微镜观察结束后处死动物，抽取房水采用Elisa法测定bFGF的含量。在1min内用4.5号针头从角膜缘做前房穿刺，3～5s内抽取0.3～0.4mL房水，置于消毒过的离心管，立即80℃保存待测。bFGF含量测定前冷冻保存的房水需先于室温下复融。
统计学处理：房水bFGF含量为均值±标准差。用SPSS15.0统计软件处理各指标数据。对等级资料的比较采用Mann Whntiey U检验。对计量资料先进行正态检验和方差齐性检验，满足正态分布和方差齐性后，同时间点两组比较采用配对t检验，两组间的比较采用单因素方差分析。P＜0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1前房炎症反应 两组前房炎症反应均在术后7～15d内缓解，15d后消退。术后3d，实验组角膜水肿、房水混浊、前房纤维蛋白渗出较对照组明显减轻，差异有非常显著意义（P<0.01，表1）。15d时两组比较已无显著性差异。结果说明，前房灌注浓度为50kU/L的LMWH能够减轻术后角膜水肿、房水混浊、前房纤维蛋白渗出的程度，从而减轻前房炎症反应，促进患者快速恢复。
2.2房水bFGF含量 术后1d时实验组和对照组房水bFGF含量同时升高，对照组明显高于实验组（P<0.05）。1d后实验组bFGF含量下降并和术前比较无差异；对照组bFGF含量继续升高，并在6d达峰值，此后缓慢下降，45d后恢复术前水平。3～30d期间两组bFGF含量差异显著（P<0.01）。从45d开始两组无显著性差异。结果说明，前房灌注浓度为50kU/L的LMWH能显著降低晶状体摘除术后房水bFGF含量(表2)。
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