作者：王宇雷 作者单位：山东大学齐鲁医院
【摘要】 目的：评价532nm半导体激光诱导棕色挪威(brown norway，BN)大鼠脉络膜新生血管（choroidal neovasularization，CNV）模型的可行性。方法：使用半导体激光（功率150?mW，光斑直径75?μm，曝光时间0.1?s）对10只BN大鼠建立CNV模型。分别于光凝后7、14、21和28?d随机选取5只行眼底荧光素血管造影术（fundus fluorescein angiogrphy,FFA）和光学相干断层成像术（optical coherence tomography,OCT）检查,比较FFA早期（<2?min）和晚期（>10?min）荧光渗漏斑数/平均渗漏面积（mm2）的变化，并行统计学分析。结果：光凝后FFA检查经组间两两比较，14、21和28?d的早期荧光渗漏斑数/渗漏面积差异无统计学意义(P>0.05)，14、21和28?d与7?d相比差异有统计学意义(P<0.05)；7、14、21和28?d早期和晚期荧光渗漏斑数差异无统计学意义(P>0.05)。激光斑视网膜的平均厚度与平均荧光渗漏面积有相关性（r=0.73，P<0.05）。结论：半导体激光诱导BN大鼠的CNV模型是可行的。FFA联合OCT可有效检测CNV的形成和变化。
【关键词】 半导体激光 脉络膜新生血管化 眼底荧光素血管造影术 光学相干断层成像术 大鼠 近交BN
AA diode laserinduced choroidal neovascularization model in
Brown Norway rats: an experimental study
WANG Yulei1， QU Yi1， ZHOU Fang1， FENG Jinbo2
(1. Department of Ophthalmology; 2. Key Laboratory of Cardiovascular Remodeling and Function Research,
Chinese Ministry of Education and Chinese Ministry of Public Health, Qilu Hospital of Shandong University,
Jinan 250012, Shandong, China)
［ABSTRACT］ Objective: To evaluate the feasibility of the diode laser in inducing choroidal neovascularization (CNV) in Brown Norway (BN) rats. Methods: Ten diode laser spots (75?μm, 0.1?s and 150?mW) were applied to one fundus around the optic disc of 10 BN rats. The same spot of CNV formation was determined by fundus fluorescein angiography (FFA) and optical coherence tomography (OCT) on the 7, 14, 21 and 28?d after laser photocoagulation. The changes of the number /area ratio of fluorescein leakage（mm2） at the earlyphase (<2 minutes) and the latephase (>10 minutes) of each day were measured. Results: The number /mean area ratio of the fluorescein leakage had not a statistically significant difference among the early FFA phase on the 14, 21 and 28?d (P>0.05), but a significant difference between the 14, 21 and 28?d and the 7?d (P<0.05). The number of the fluorescein leakage at the earlyphase of 7, 14, 21 and 28?d was not significantly different from that at the latephase (P>0.05). The correlation of the mean area of the fluorescein leakage and the mean retinal thickness was obvious（r=0.73, P<0.05）. Conclusion: The laserinduced rat is suitable for studying CNV in vivo. FFA combined with OCT is better for detecting the formation and the changes of CNV.
［KEY WORDS］ Diode laser; Choroidal neovascularization; Fluorescein angiography; Optical coherence tomography; Rat, BN 脉络膜新生血管（choroidal neovascularization，CNV）又称视网膜下新生血管，是由多种病因所致的脉络膜血管芽穿越Bruch膜并在视网膜色素上皮（the retinal pigment epithelium, RPE）下和/或上增殖形成的纤维血管膜，常伴有黄斑部视网膜下的反复出血、渗出、机化以及瘢痕形成，是老年人群重要的致盲原因之一［1］。由于CNV的发病机理尚不十分清楚，尽管治疗方法多样，却缺乏令人满意的疗效。制作CNV动物模型是该研究的基础。本研究利用532?nm半导体激光诱导棕色挪威(brown norway,BN)大鼠CNV的形成，并运用眼底荧光素血管造影术（fundus fluorescein angiogrphy,FFA）和光学相干断层成像术（optical coherence tomography, OCT）对此模型的可行性进行评价。
1 材料与方法
1.1 实验动物和仪器 雄性BN大鼠10只，体重280 320?g(购自北京威通利华公司),正常环境饲养。实验前双眼前节和眼底检查均正常。大鼠一眼为实验眼,另一眼为对照眼。
主要仪器：532?nm半导体激光机(美国Coherent公司)，FFA摄像机(德国Heideberg公司)，光学相干扫描仪(OCT)（德国Zeiss公司）。
1.2 大鼠CNV模型的建立 大鼠腹腔注射氯胺酮100?mg/kg麻醉成功后，美多丽散瞳，半导体激光（功率150?mW，光斑直径75?μm，曝光时间0.1?s）围绕视盘击射10个点，以光凝时见气泡形成为准。分别于光凝后7、14、21和28?d随机选取5只麻醉后，行FFA(腹腔注射20％荧光素钠0.5?ml/kg)和OCT检查，比较FFA 早期（<2?min）和晚期（>10?min）荧光渗漏斑数和渗漏面积（mm2）的变化。（应用江苏捷达801系列图像分析系统测量渗漏面积）。
1.3 统计学处理 应用SPSS10.0软件对所得数据组间差异用单因素方差分析，组间两两比较用LSD检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 FFA检查结果 正常大鼠视盘周围视网膜血管成放射状，10 14条，管径均匀，逐级分支 (图1)。腹腔注射荧光素钠平均10?s血管开始显影。实验眼光凝后光斑部视网膜白色水肿,无荧光渗漏，部分见视网膜下少量出血(图2,3)。光凝后7?d，部分光凝区呈不规则的荧光渗漏，晚期渗漏面积增大(图4)，其中1眼视盘周血管纡曲、扩张、管径不均，无荧光渗漏(图5)。光凝后14?d,光凝区荧光渗漏斑数量增加，面积增大，晚期呈高荧光(图6)，光凝后21?d，荧光渗漏斑数达高峰，形状不规则(图7),光凝后28?d，荧光渗漏数和渗漏面积无明显变化(图8)。光凝后FFA检查经组间两两比较，14、21和28?d的早期荧光渗漏斑数/渗漏面积差异无统计学意义(P>0.05)，14、21和28?d与7?d相比差异有统计学意义(P<0.05)；7、14、21和28?d早期和晚期荧光渗漏斑数差异无统计学意义(P>0.05)（见表1）。表1 FFA检查光凝后不同时间荧光渗漏斑数
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