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3 讨 论
科学可行的动物模型是研究CNV发病机制和评估药物干预疗效的前提。诱发CNV形成的动物模型可分为3种：①自然动物模型 这种模型与人类CNV有许多相似之处，但CNV发病周期长，发生率低故很少被采用。②基因动物模型 转基因小鼠感光细胞［2］或RPE细胞［3］可过度表达VEGF，诱导出新生血管，此类新生血管并不是真正的CNV，且制备难度大、费用高，难以推广。③激光损伤动物模型 研究表明这种模型中出现高荧光渗漏的光斑病理学检查均发现了CNV［4］，且与脉络膜毛细血管同源。故激光损伤模型被广泛应用于CNV的研究。
本实验选用532?nm半导体激光（功率150?mW，光斑直径75?μm，曝光时间0.1?s）诱导大鼠CNV形成，光凝后7?d腹腔注射荧光素钠发现光凝区不规则的荧光渗漏，提示CNV形成，光凝后14?d 的成模率为55％，至21?d渗漏斑面积增大,形成稳定的CNV，成模率为69％,与王洵等［3］报道的一致。证实此模型易诱导、形成速度快、成模率高且稳定性好，同时大鼠体积小，腹腔注射荧光素钠较尾静脉注射更容易操作。
FFA是诊断和评价CNV最常用的方法。Dobi等［6］发现鼠CNV模型FFA检查在动脉期开始显影，晚期持续不退，与视网膜血管无关。本实验结果显示：光凝后立刻腹腔注射荧光素钠检查即见100％的高荧光斑但无荧光渗漏，考虑为激光损伤血管，视网膜水肿；光凝后14 28?d FFA 检查可见光凝处早期有荧光渗漏，呈片状，随时间延长荧光范围增大，亮度增强，提示有CNV形成。典型性CNV在FFA动脉前期或动脉期可见边界清晰的强荧光轮廓，但大鼠FFA动脉前期或动脉期的具体时间尚未见明确划定。目前报道［79］多在注射荧光素钠后10?min 左右通过观察荧光渗漏的数量、面积及密度等来评估CNV的形成和变化。本研究参考Koh HJ等［10］将观察时间分为早期（<2?min）和晚期（>10?min）,结果显示7、14、21和28?d FFA早期和晚期大鼠荧光渗漏的数量无统计学差异(P>0.05)，随时间的延长，荧光渗漏斑面积增大，推测激光诱导的CNV可能为典型性CNV。7?d时早期和晚期荧光渗漏数量和面积与14、21和28?d相比有统计学差异(P<0.05)，推测与光凝后早期部分新生血管尚未完全形成有关。14?d荧光渗漏数量和面积与21和28?d相比无明显差异(P>0.05), 推测14?d时CNV在已完全形成。
OCT是一种利用光对视网膜组织结构进行断层扫描的非侵入性、非接触性影像学检查。OCT通过多轴扫描能直观的显示CNV的形态和CNV与RPE之间的关系［11］。本研究结果显示：光凝后7?d OCT检查见光凝区视网膜神经上皮层断裂，光凝后14?d见光凝区局部增厚，呈白色高反射，边界不清，证实CNV形成。光凝后21和28?d光凝区视网膜明显增厚，呈多层高反射区。表明OCT检查能有效地动态地观察CNV的形成和变化，与以往的报道［1214］相符。本实验结果显示：OCT检查与FFA具有良好的同步性和相关性：荧光渗漏斑面积越大，OCT显示视网膜越厚，其相关系数r=0.73。本研究通过FFA与OCT检查在活体上动态地证实了CNV在14?d时完全形成，21和28?d时CNV处于稳定期。这提示在选择CNV模型的治疗时机时，可以14?d为起始点。
综上所述，半导体激光诱导BN大鼠的CNV模型是可行的, 此模型易诱导、形成速度快、成模率高且稳定性好，腹腔注射荧光素钠操作简便，OCT联合FFA可有效地动态地观察CNV的形成和变化，FFA与OCT均显示CNV在14?d时完全形成，21和28?d时处于稳定期。本研究将为CNV治疗的实验研究奠定基础。
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