2 结果
2.1 MTT测定结果显示不同浓度TGF-β2分别作用24,48,72 h后均能显著抑制晶状体上皮细胞的增殖(表1),TGF-β2的效果与作用浓度、作用时间有关;浓度较低时,TGF-β2发挥效果慢,但作用持久。将每一时间点的实验组与空白对照组比较,由公式
计算出TGF-β2对细胞增殖的抑制率(图1),从17%至35%不等。
表1 TGF-β2对晶状体上皮细胞增殖的作用(±s,n=11)
Tab.1 The effects of TGF-β2 on the
proliferation of LECs(±s,n=11)
Concentrations of
TGF-β2(ng/ml) |
Absorbance value(%) |
24 h |
48 h |
72 h |
0 |
0.377±0.117 |
0.407±0.152 |
0.422±0.197 |
0.001 |
0.278±0.102b |
0.317±0.141b |
0.285±0.165c |
0.01 |
0.273±0.102c |
0.293±0.150c |
0.276 ±0.160c |
0.1 |
0.311±0.104b |
0.302±0.153c |
0.272±0.155c |
1 |
0.294±0.101c |
0.309±0.153c |
0.312±0.156 |
10 |
0.277±0.107c |
0.337±0.140b |
0.324±0.146 |
Paired rank sum test,bP<0.05,cP<0.01 vs control group
图1 不同浓度TGF-β2抑制晶状体上皮细胞增殖
Fig.1 TGF-β2 inhibited LECs proliferation
2.2 依据上面的结果,我们选择0.01 ng/ml,0.1 ng/ml研究TGF-β2对晶状体上皮细胞凋亡的作用。光镜下观察TUNEL法染色后细胞,正常生长细胞的细胞核复染后呈绿色,凋亡细胞核的DNA断端经标记后细胞核呈黄色和棕黄色。较早出现的阳性细胞核仅边缘呈黄色,TGF-β2作用较长时间后,有的阳性细胞核呈均匀着色。
由图2可见,正常生长的晶状体上皮细胞中有5%的细胞自发凋亡,TGF-β2作用后,凋亡细胞百分率逐渐上升。0.01 ng/ml TGF-β2作用4 h后,凋亡细胞百分率升至11.25%,明显高于未加因子组(P<0.05);作用8 h后效果更为明显(P<0.01)。0.1 ng/ml TGF-β2作用0.5 h,凋亡细胞百分率即明显升高,达9.5%,而后曲线平稳上升,各时间点结果均与未加因子组有明显差异(P<0.01)。
图2 TGF-β2对晶状体上皮细胞凋亡的作用(n=8)
Fig.2 LECs apoptosis induced by TGF-β2(n=8)
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