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2 结果
2．1 体外实验
LEC传代至第3～5代增殖最快，按1∶2分皿后约5天即可融合。传代至96孔板的细胞在8h内几乎完全贴壁，按3×104的细胞密度添加可在7～10天内达到融合。5-Fu作用不同时间对LEC增殖的抑制作用不同。A组中各质量浓度5-Fu对兔LEC均无明显抑制作用。B组中，质量浓度＞80μg／ml可以抑制LEC增殖(P＜0.001)，在倒置显微镜下观察，发现细胞间彼此分离，终止抑制，换液培养后，有少数细胞尚可继续增殖。加入MTT后，变形的细胞几乎不着色，说明细胞已死亡；质量浓度达250μg／ml时，细胞边界消失，换液培养后，无细胞增殖，此质量浓度加入MTT后，细胞完全不着色。C组加药后，第7天观察到，药物质量浓度大于0.25μg／ml时，OD值与对照组间即有显著性差异(见表1)；当质量浓度低于4μg／ml时，细胞形态无明显变化；当质量浓度达到8μg／ml时，可见细胞在皿底单个散在分布，呈不规则形，细胞边界呈波纹状，MTT染色，可以清楚地看到对照组，中间质量浓度组和高质量浓度组间细胞密度的差异。
表1 C组5-Fu作用7天的抑制效果 (n＝8)
Tab．1 5-Fu inhibitory effect after 7-d reaction in group C（n＝8）
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5-Fu concentration
(μg／ml) |
OD value |
t value |
P value |
| 0 |
0.154 |
| 0.125 |
0.144 |
1.97 |
＞0.05 |
| 0.25 |
0.137 |
4.84 |
＜0.01 |
| 0.05 |
0.126 |
6.06 |
0.001 |
| 1 |
0.126 |
10 |
＜0.001 |
| 2 |
0.13 |
2.64 |
＜0.05 |
2．2 体内实验
各眼球角膜均发现炎性反应，有浆细胞和淋巴细胞浸润，且主要集中在角膜缘血管网周围，炎症的严重程度虽有不同，但都局限在角膜基质层的外1／5厚度内。前房注射5-Fu为0.5μg／ml时，角膜透明，角膜内皮细胞计数及六边形率大致正常，细胞形态无明显变化(见图1)，角膜缘炎症为灶性，炎性细胞散在分布(炎性细胞计数见表2)，虹膜基质偶见浆细胞浸润；质量浓度为5mg／ml时，角膜透明，内皮细胞计数及六边形率降低，细胞膜增厚，蛋白物质沉积，角膜缘炎症为小片状，淋巴细胞显著增多，虹膜及睫状体有炎性细胞散在分布；质量浓度为25mg／ml时，除上述改变外，可见角膜浸润、水肿及内皮细胞膜上串珠样蛋白物质沉积(见图2)，角膜缘炎性细胞呈团状或带状密集分布，浆细胞显著增多，虹膜及睫状体可见灶性炎细胞浸润。
 
图1 0.5μg／ml5-Fu前房注射后角膜内皮细胞染色，细胞边界清晰 图2 25mg／ml5-Fu前房注射后角膜内皮细胞染色，细胞膜水肿，蛋白物质沉积 Fig．1 Rabbit corneal epithelial cells were stained after anterior chamber injection of 0.5μg／ml5-Fu，and the cell borders were clear Fig．2 Rabbit corneal epithelial cells were stained after anterior chamber injection of 25mg／ml5-Fu．Protein materials deposits on the edematous cell membrane
表2 不同质量浓度5-Fu前房注射后角膜缘炎细胞计数(n＝10)
Tab．2 Inflammatory cell counting on the limbus of cornea
after anterior chamber injection of 5-Fu(n＝10)
| 5-Fu concentration |
Plasmacyte |
Lymphocyte |
 ±s |
tvalue |
Pvalue |
±s |
tvalue |
Pvalue |
| 0.5μg／ml |
8.8±5.3 |
|
|
27.4±14 |
|
|
| 5mg／ml |
9.5±3.2 |
0.08 |
＞0.05 |
98±61 |
4.39 |
＜0.05 |
| 25mg／ml |
12.7±3.4 |
4.29 |
＜0.01 |
97±68 |
3.87 |
＜0.01 |
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