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2.3房水中药物浓度
术后1wk内每日抽取房水，测定CsA浓度分别为0.24，0.22，0.20，0.17，0.15，0.13，0.11mg/L，于14,21,28wk测定房水中CsA浓度分别为0.08，0.07，0.05mg/L，房水中药物浓度随时间推移呈缓慢下降趋势。表2成纤维细胞AgNoRs颗粒数的比较(略)
2. 4组织病理学检查结果
HE染色观察术后3d，实验组、对照组均可见到结膜下、巩膜瓣下出现中性白细胞、淋巴细胞、单核细胞，巩膜瓣下、咬切口区出现少量功能活跃的成纤维细胞，细胞核呈椭圆形，局部有纤维束纤维连接蛋白团块。术后7d,实验组可见成纤维细胞数量稍增多；对照组成纤维细胞在所有切片中数量明显增多，在结膜下、巩膜瓣下及咬切口可见大量成纤维细胞及部分白细胞、淋巴细胞、内皮细胞。术后15d,实验组局部没有明显炎症反应，大部分在咬切口区可见到开放的咬切口，少数切片咬切口堵塞；对照组切片全部为纤维结缔组织堵塞滤过道，损伤的组织被完全修复。术后28d，成纤维细胞基本转化为纤维细胞，并见大量胶原纤维。实验组咬切口堵塞的切片约有25%,对照组为100%。
2.5成纤维细胞AgNoRs表达
功能活跃的成纤维细胞核呈椭圆形或回形，核内有1～6个AgNoRs颗粒，呈小圆形或方形，较核颜色深，随时间推移细胞核逐渐变扁，呈条梭形，核内AgNoRs颗粒数减少，成为功能不活跃的纤维细胞(表2)。
3讨论
目前青光眼术后抗增殖的药物主要有丝裂霉素C（MMC）、5氟尿嘧啶（5FU）等，这些药物的常规用药方式为术中将浸有药物的海绵片置于巩膜瓣上和/或巩膜瓣下,术后可能会造成角膜上皮缺损、滤过泡渗漏、持续性低眼压等并发症，且由于不同术者所切取的海绵片的形状和大小不同,药物浓度悬殊很大。CsA是由霉菌生成的一种脂溶性环状十一肽化合物，Mr1202.64，具有强大的免疫抑制功能,在眼科用于角膜移植术后取得良好疗效。近年来研究发现,在适当浓度下CsA能有效抑制多种细胞增殖[5]。利用CsA抗增殖作用效应, Turacli等[6,7]将其应用于原发性开角型青光眼滤过手术中，CsA抗瘢痕形成机制非常复杂,在青光眼滤过手术中确切作用机制尚不清楚,近年来研究发现,CsA可以作用于青光眼滤过术多个环节[5]:（1）通过靶物质与相应的转录基因调控蛋白结合而产生作用;（2）通过抗炎、抑制各种细胞因子的产生以及抑制成纤维细胞活化;（3）通过抑制血管形成,使局部血管痉挛、缺血;（4）诱导成纤维细胞凋亡;（5）抑制成纤维细胞分泌胶原纤维。PLGA具有很好的药物缓释功能，近年得到广泛应用。PLGA表面可不断更新,从而为组织的黏附和生长提供不断变化的界面。改变PLGA中组分的比例可以调整释放药物的速度及自身降解的时间。其表面不断降解形成微孔,暴露内部包封药物,可作为可控性释放药物的植入性载体[8] 。PLGA已在眼科实验研究中制成巩膜塞作为玻璃体内缓释系统的载体，被证明具有良好的眼内相容性。我们以PLGA为载体，携带CsA制成环孢素A缓释系统，研究结果显示兔眼对CsA DDS表现出良好的耐受性，缓释剂植入部位未见炎症反应、组织变性坏死及其他不良反应。术后7～21d实验组房水中的CsA保持了一个有效药物浓度的平台，随时间推移呈缓慢下降趋势；房水中药物高峰质量浓度大于兔结膜下成纤维细胞的D50,低于引起角膜内皮毒性和视网膜毒性的水平。
AgNoRs的数量和构型反映了细胞增殖活性的强弱，本实验对照眼AgNoRs对成纤维细胞的表达表明，成纤维细胞从术后2～3d开始增生，5～7d增殖最旺盛，以后逐渐减弱，最后成纤维细胞转化为纤维细胞，其增殖规律与Jampel等[9,10]所观察结果相同。实验眼术后各时间点与对照眼AgNoRs颗粒值有显著性差异，实验眼中成纤维细胞的增殖受到明显抑制。研究结果表明,CsA DDS能有效抑制滤过性手术后的炎症反应及成纤维细胞的增生,防止滤过泡瘢痕化,提高兔眼滤过性手术的成功率。
【参考文献】
1 Chen CW, Huang HT, Bair JS, et al. Trabeculectomy with simultaneous topic application of mitomycin C in refractory glaucoma. Ocul Pharmacol2000;6(3):175182
2 Park KH, Kim DM, Youn DH. Topical cyclosporin A and glaucomadrainage implant surgery in rabbits. Ophthalmic Surg Lasers2005;27:482488
3 Doyle JW, Sherwood MB, Khaw PT, et al. Interaoperative 5fluorouracil for filtration surgery in the rabbit. Invest Ophthalmol Vis Sci2003;98:503505
4 Khaw PT, Doyle JW, Sherwood MB, et al. Effects of intraoperative 5fluorouracil or mitomycin on glaucoma filtration surgery in the rabbits. Ophthalmology1993;100:367369
5王继兵.环孢霉素A抗增殖作用的研究.国外医学眼科学分册 1999;23:9397
6 Turacli ME, Gunduz K, Aktan G, et al. Topical cyclosporin A as a possible new antimetabolite in trabeculectomy. Ophthalmic Surg Lasers
1996;27:438443
7 Turacil ME, Gunduz K, Aktan G, et al. A comparative clinical trial of mitomycin C and cyclosporin A in trabeculectomy. Eur J Ophthalmol1996;6(4):398401
8刘昭升,谢立信,史伟云,等.环孢素A缓释系统的眼内释药性和生物相容性的实验研究.中华眼科杂志 2004;40:110112
9 Jampel H, McGuigan L, Peopos JS. Biology of experimental glaucoma filtering surgery failure. Invest Ophthalmol Vis Sci1997;28(3):378379
10明萍,周斌,李泽容.小梁切除联合丝裂霉素C治疗青光眼再手术远期疗效观察.国际眼科杂志 2007;7(2):526528 上一页 [1] [2] |
