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2 结 果
酶组织化学染色法可使角膜上皮细胞内的乳酸脱氢酶（LDH）表现为蓝色反应颗粒，琥珀酸脱氢酶（SDH）表现为紫蓝色反应颗粒， VIDAS图象分析系统测得的光密度值（OD）代表细胞内的酶活性。实验组与正常对照组之间的光密度值进行统计学分析比较，所有数据均使用SPSS10.0统计处理软件包。数据以均数±标准差（±s）表示，采用方差分析中Dunnett t检验。详见表1。表1 实验组与正常对照组角膜上皮层
3 讨 论
准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术是一种融合了PRK和LASIK不同特点的、新型准分子激光屈光手术，其最大特点是制作并保留了一个具有较高生物学活性的角膜上皮瓣。高活性的角膜上皮瓣使LASEK术后疼痛、角膜混浊、屈光回退等的发生率明显减轻［2,3］；由于LASEK的角膜上皮瓣仅包含角膜上皮层和基底膜而无浅基质层，比常规LASIK角膜瓣节省了约50-100mm的角膜厚度，安全系数明显提高，手术适应范围进一步拓宽。
角膜上皮细胞之间结合紧密、排列整齐，对外界的微生物及其毒力有较强的抵抗力，是角膜天然的生理屏障，角膜上皮层与前弹力层之间界限清楚易于分离［4］，是LASEK的组织学基础。临床发现较高浓度的乙醇溶液会使角膜上皮细胞迅速凝固坏死，丧失活性，而低浓度、低张力的20%乙醇溶液，却可以在适当的时间内，使角膜上皮层与前弹力层之间的结合更疏松、更易于分离，角膜上皮细胞却依然保留有较高的活性，仍可发挥其重要的生物学作用。
角膜上皮细胞通过葡萄糖的有氧氧化和无氧酵解两种方式获取能量，在细胞内糖代谢的过程中，琥珀酸脱氢酶（SDH）位于线粒体质膜和嵴上，是线粒体的标志酶，也是有氧氧化的关键酶。乳酸脱氢酶（LDH）广泛存在于细胞浆中，是糖无氧酵解的关键酶。正常的角膜上皮细胞一旦受到损伤，细胞膜破裂或通透性增大，细胞内的活性酶就会流失。本研究的结果表明，20%乙醇浸润兔角膜上皮细胞如果不超过30 s，角膜上皮细胞内酶的活性基本正常，能够维持正常的生理解剖功能；而浸润时间一旦达到或超过40 s，角膜上皮细胞内酶的活性将明显降低，角膜上皮细胞基本丧失了正常的生理解剖功能；而且浸润时间越久，角膜上皮细胞的活性丧失越明显，LASEK的优势也就无从体现。
众所周知，LASEK优势的最大支承点是高生物学活性的角膜上皮瓣［5］，因此适宜的乙醇浓度，适宜的乙醇浸润时间，是成功制作高活性角膜上皮瓣的关键。本研究表明，20%乙醇作用于角膜上皮细胞的浸润时间不应超过30 s。
【参考文献】
［1］ Lojda Z,Gosstau R,Schiebler TH.Enzyme histochemistry［J］.A laboratory manualed Berlin:Springer- Verlay,1997,48:258-284.
［2］ Lee JB,Seong GJ,Lee JH,et al.Commparison of laser epithelial keratomileusis and photorefrectiva keratectomy for low to moderate myopia［J］.J Cataract Refract Surg,2001,27（4）:565-570.
［3］ Cimberle M.LASEK has more than 1 year of successful experience［J］.Ocular Surgery Nems,2000,11:30-33.
［4］ 阎洪禄,于秀敏.眼科生理学［M］.人民卫生出版社,2001.14.
［5］ 周行涛,吴良成,戴锦晖,等.准分子激光上皮瓣下角膜磨镶术的角膜上皮瓣异常［J］.中华眼科杂志,2002,38（2）:69-71. 上一页 [1] [2] |
