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结果
一、混合培养的RGCs存活及生长规律
混合培养的RGCs按500个/mm2细胞密度接种，相差显微镜下观察，细胞于培养3或4h开始贴壁，贴壁后细胞有聚集生长的现象，24h细胞伸出粗、细、长、短不等的突起。细胞体呈多边形，胞体中部较暗，光晕明显，大多数细胞质折光强；2天后突起增多，并伸长。培养1周后，胞体折光降低。培养2或3周后存活细胞已很少。
视网膜细胞于培养1天、2天及4天，经自动图像分析系统处理，得出细胞的胞体直径和突起长度（表1）。
表1 不同培养时间RGCs细胞突起长度及胞体直径（ ±s）
| 培养时间(d) |
细胞突起长度(μm) |
细胞体直径（μm） |
| 1 |
14.70±1.60 |
9.27±1.05 |
| 2 |
19.50±9.70* |
10.78±0.98* |
| 4 |
22.20±3.80** |
11.18±1.62 |
*细胞培养2天与1天比较，P＜0.01 **细胞培养4天与2天比较，P＜0.01 由表1可见细胞培养第2天，RGCs胞体直径增大，突起增长，与培养第1天比较差异有显著性（P＜0.01）。至培养第4天，细胞胞体直径不再增大，与第2天比较差异无显著性（P＞0.05）；但突起仍增长，与第2天组比较差异仍有显著性（P＜0.01）。
二、RGCs存活生长特性
1.Te对混合培养的RGCs存活生长的影响：MTT微量比色法定量培养24h后（细胞接种密度5000个/mm2）细胞存活的吸光度(A)值，无Te的对照组为0.029±0.006，加Te的实验组为0.089±0.005；可见加Te组比较活跃,吸光度(A)值增加了3倍（P＜0.01）。
2.不同接种密度时，有突起生长的细胞数比较。
表2 SD乳鼠RGCS体外培养不同接种密度的细胞中有突起的细胞数
| 接种密度 |
不同培养时间的细胞计数（±s） |
| 12h |
1d |
2d |
4d |
| 500个/mm2 |
94.50±
7.05 |
104.50±
5.50 |
166.75±
5.40 |
99.75±
4.26 |
| 1000个/mm2 |
192.25±
8.46* |
263.00±
8.57* |
507.00±
17.10** |
235.25±
11.39* |
*两种接种密度比较,P＜0.05 **两种接种密度比较,P＜0.01 由表2可见细胞接种密度500个/mm2与1×1000个/mm2相比，有突起的细胞数差异有显著性；且在培养第2天，后者高于前者3倍以上。
3．纯化后的RGCs存活生长特性：纯化后的RGCs按500个/mm2接种，培养3h后，相差显微镜下观察细胞已贴壁，形态为多边形，无细胞突起伸出。培养24h后细胞长出突起，且细胞分布稀疏、分散，无聚集生长的现象。48h后很少见到存活的细胞。加入Te后存活的细胞数增多，同一时间内加Te组与不加Te组比较差异有显著性。
表3 接种密度为500个/mm2纯化培养的SD乳鼠RGCs细胞计数
| 组别 |
不同培养时间的细胞计数（±s） |
| 2h |
24h |
48h |
| 加Te组 |
244.00± 7.57 |
95.00± 8.08 |
29.70±7.61 |
| 不加Te组 |
222.50±19.46* |
60.50±13.90** |
1.17±0.22** |
*不加Te与加Te组比较，P＜0.05 **不加Te与加Te组比较，P＜0.01 三、RGCs的鉴定
经FITC-Thy-1.1单克隆抗体免疫反应，荧光显微镜下见RGCs呈阳性，表现为细胞膜表面呈黄绿色荧光，形态为多边形，有时可显示有伸出的突起。纯化培养时阳性细胞数较混合培养时为多。
四、RGCs的纯度检测
随机取10个视野，分别于荧光显微镜和相差显微镜下观察计数，并计算出荧光显微镜下阳性细胞数占相差显微镜下细胞总数的百分比，结果为94.7%～96.1%。
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