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模拟远程投送对甘油长期冷冻保存兔角膜内皮细胞的影响

http://www.cnophol.com 2009-8-26 11:09:06 中华眼科在线

  2结果

  2.1 PKP术后锥蓝茜素红联合染色  对照组与实验组模拟远程运输并复温复水后,各组角膜无明显水肿,角膜环锥蓝茜素红联合染色未发现明显核蓝染细胞,可见内皮散在点状茜素红染色和少量皱折处条状茜素红染色区,各组角膜内皮细胞密度、死亡率及异形率无显著性差异(表1)。术后1mo植片苔盼蓝茜素红联合染色各试验组与对照组植片CEC大小趋于一致,溶解细胞与活细胞对比更加鲜明,溶解细胞只在模糊的背景下遗留淡蓝色的细胞核。各组术后植片平均CEC密度、细胞脱落区及溶解区面积经方差分析结果显示均无显著性差异(表1)。

  2.2 PKP术后裂隙灯检查  术后3,7,14,21,30d时各试验组与对照组的植片透明率无显著性差异(表2)。

  表2  PKP术后角膜植片透明情况(略)

  *注:T:transparent,透明;B:blur,轻度混浊;S:semitransparent,半透明;O:opacity,完全混浊。

  2.3 PKP术后角膜植片厚度  术后不同时间各组的植片厚度经方差分析差异均无显著性(表3)。术后3,7,14,21,30d,B,C,D,E组与A组的角膜植片厚度比较均无统计学差异。

  表1  术后角膜环CEC活性染色结果(略)

  表3  PKP术后各组角膜植片厚度观察(略)

  3讨论
   
  角膜移植术后的关键指标在于角膜的透明度。术后植片内皮细胞存活的数量与质量则是决定角膜是否透明及穿透性角膜移植成功与否的关键。而眼库角膜的运送方式是否会对角膜产生影响并最终影响到手术的效果,国内目前尚无相关报道,国外学者也仅仅对中期保存的角膜远程投送后行临床PKP的术后效果,进行过回顾性的对比研究[4-6],但对于甘油长期冷冻保存的角膜远程投送行PKP术的研究,目前国内外尚无相关的报道。这就使其在角膜移植的临床应用时对结果缺乏可控性及预期性,所以缺乏在临床上进一步应用的前景。
   
  我们通过实验室模拟远程投送甘油长期保存的兔角膜的研究,在研究中我们使用了本科室研究的改良后的甘油长期保存角膜的方法,其优点是保存方法体现了简便、经济、有效的同时,通过甘油和透明质酸钠对角膜内皮的保护,保证了角膜内皮的质量与数量。我们在实验中充分考虑到了除机械震动以外的各种会影响角膜内皮活性的因素,在温度方面我们采用了美国眼库协会程序手册对角膜组织运输中的包装、密封要求,实验室摇床采用了均衡频率的仪器来模拟远程投送中振动环境,时间上则结合国内的海陆空实际,一般在5h以内为依据,而且采用了相同的复温复水方式并由同一术者进行角膜片的制备、保存和手术,避免了因术者不同而导致的角膜内皮不同的机械性损伤。由此排除了因温度、制备过程等非震动因素对角膜内皮细胞的影响。
   
  通过实验结果表明,实验组与对照组的角膜环及术后1mo角膜活性染色内皮细胞边界清楚,细胞形状清晰可见,为规则的六角形,细胞少量脱落,核无明显蓝染。术后实验组与对照组角膜均较透明,角膜厚度逐渐变薄并趋于正常。实验组与对照组无明显差异。以上结果表明,通过对实验室模拟远程投送后的实验性PKP术后观察,一定范围的机械震动无论是对CEC活性还是对实验性手术的效果都无显著性影响。此研究不仅填补了国内外在异地角膜运输行PKP术理论上的空白,而且为实际临床应用急诊抢救眼外伤患者,在保证患者保住眼球的基础上,达到更好的手术效果提供了可能。但为了充分了解实际远程投送下行PKP术的应用前景,解决我国战时和平时各地临床之所需,并最终提高我国的平、战时的眼库战略贮备能力和远程投送能力,还需进一步的临床验证。

  【参考文献】

  1谢立信.角膜移植学.北京:人民卫生出版社,2000:4,165

  2范军华,蒋华.甘油冷冻长期保存兔角膜内皮细胞的活性.国际眼科杂志,2006;6(3):573577

  3 Halberstadt M, Athmann S, Winter R. Impact of transportation on shortterm preserved corneas preserved in OptisolGS, Likorol, LikorolDX, and MKmedium. Cornea,2000;19(6):788791

  4 Varssano D, Russ V, Linhart Y, Lazar M. Air transportation of corneastissue:experience with local compared to transatlantic donor corneas. Cornea,2005;24(6):674677

  5 Shimazaki J, Shinozaki N, Shimmura S, Lazar M. Efficacy and safety of international donor sharing: a singlecenter, casecontrolled study on corneas transplantation. Transplantation,2004;78(2):216220

  6 Hu FR, Tsai AC, Wang IJ. Outcomes of penetrating keratoplasty with imported donor corneas. Cornea,1999;18(2):182187

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(来源:互联网)(责编:xhhdm)

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