|
2.2 角膜内皮机检测
2.2.1 保存组 保存后角膜内皮细胞密度及六边形细胞比率虽低于保存前，但差异均无统计学意义(P＞0.05，见图5、表1）。最大面积细胞保存前小于保存后,相对应的最小面积细胞则大于保存后。
细胞排列整齐,大小均匀
图5 保存组保存后角膜内皮细胞检测图像
2.2.2 对照组 保存后角膜内皮细胞密度及六边形细胞比率虽低于保存前，但差异均无统计学意义(P＞0.05，见图6、表1）。最大面积细胞保存前小于保存后,相对应的最小面积细胞则大于保存后。
细胞排列不均,大小不等,有空缺
图6 对照组保存后角膜内皮细胞检测图像
2.2.3 两组之间角膜内皮细胞密度与六边形细胞比率比较 两组角膜内皮细胞检测结果见表1。由表1可见，两组角膜内皮细胞密度及六边形细胞比率差异均无统计学意义（P>0.05）。表1 保存组与对照组角膜内皮细胞密度与六边形细胞比率比较
3 讨 论
角膜移植的成功与否在很大程度上取决于角膜内皮细胞的数量及生物活性。当角膜内皮细胞密度>700个·mm-2时,移植的角膜才能发挥正常功能；<700个·mm-2时,角膜内皮细胞功能则出现失代偿。而穿透角膜移植手术过程中对供体角膜内皮细胞的影响因素有机械损伤、环境改变、灌注液和冲洗液及黏稠剂刺激、内皮细胞接触空气和干燥性的影响；术后因素有房水中炎症产物的刺激以及眼内病变如青光眼、色素膜炎及其他并发症等,这些因素可以对供眼角膜内皮细胞造成损伤,导致角膜内皮细胞的细胞密度、平均细胞面积、变异系数以及细胞形态的明显变化［12］，将造成角膜内皮细胞的凋亡。由于存在上述引起角膜内皮细胞丢失的因素,故要求在术前角膜内皮细胞密度及六边形细胞比率应达到一定的数值以保证角膜移植成功。因此,有报道［3］认为,供眼角膜的内皮细胞密度应不低于2000个·mm-2。
C3F8为惰性气体,将该气体注入前房替代原有的房水,可使角膜与房水隔离,消除了房水中的有毒代谢产物对角膜内皮的损害,减少了角膜内皮细胞的丢失,也降底了角膜内皮细胞的代谢,从而使角膜内皮细胞数维持在正常范围内。
角膜保存液中含有K+、Na+、Ca2+、Cl-、蛋白等物质以及类固醇,其成分及pH值类似于房水,因此,可以维持角膜的正常厚度、透明度和代谢功能,以达到延长供体角膜生物活性的目的。
在通常情况下,由于在取角膜时损伤了部分角膜内皮细胞，或者在保存前角膜离体后，部分角膜内皮细胞缺氧、水肿，细胞面积增大导致角膜保存过程中部分内皮细胞受损丢失,保存后的角膜内皮细胞密度是低于保存前的。本研究结果表明：保存组角膜在保存前和保存后角膜内皮细胞密度差异无统计学意义，保存后角膜内皮细胞密度大于2 000个·mm-2；六边形细胞的比率在保存前后差异亦无统计学意义（P>0.05）。本研究结果显示,保存组最大细胞面积在保存前小于保存后,相对应的最小细胞面积是保存前大于保存后。这是由角膜的离体及取眼球时导致角膜内皮细胞缺氧和损伤所造成的；在放入保存液后,角膜内皮细胞丧失了部分代谢功能,使角膜内皮细胞的水肿减慢,延缓了角膜内皮细胞的凋亡。因此,在角膜内皮细胞密度变化不大的情况下,最大细胞面积还是有所提高。
本研究结果还显示,保存组和对照组的角膜内皮细胞密度均未低于2 000个·mm-2,两者差异无统计学意义（P>0.05）；两组之间六边形细胞的比率差异也无统计学意义（P>0.05）。说明用optisol、likorol角膜保护液和C3F8气体中长期保存的角膜（3～7d）与新鲜角膜（<3d）无明显差异。
从透射电镜观察上来看,正常的角膜内皮细胞超微结构是应该有完整的细胞膜、细胞核及细胞器。本研究结果显示,用optisol、likorol角膜保护液和C3F8气体保存3～7d的角膜虽然有细胞肿胀、核固缩、线粒体肿胀,也有核碎裂现象,但其内皮细胞均有完整的细胞膜,细胞之间连接紧密。细胞核固缩、线粒体肿胀及核碎裂现象可能与取材部位和操作手法有关。从扫描电镜图上看到,用optisol、likorol角膜保护液和C3F8气体保存3～7d的角膜细胞形态完整,排列整齐,细胞大小均匀,无空缺现象。这说明角膜内皮细胞的结构仍然维持在正常水平,与正常角膜内皮细胞相比无实质性的差别。
综上所述，用optisol、likorol角膜保护液和C3F8气体保存角膜可以延缓角膜内皮细胞的凋亡,延长角膜保存时间,为偏远地区患者能在一定的时间内争取到手术创造了条件,在临床上应具有很好的应用价值。
【参考文献】
［1］Ohguro N,Matsuda M,Kinoshita S.Effects of posterior chamber lens implantation on the endothelium of transplanted corneas［J］.Br J Ophthalmol,1997,81(12):10561059.
［2］肖琼,黄菊天.角膜移植术后供体角膜内皮细胞的变化［J］.中国实用眼科杂志,2005,23（5）：499501．
［3］葛钧,肖琼,黄菊天,等.穿透性角膜移植的内皮细胞变异分析［J］.中国实用眼科杂志,2003,21（3）：197200. 上一页 [1] [2] |
